改良三甲散含药脑脊液对脂多糖诱导的bv2小胶质细胞炎症模型相关.pdf

第４０卷第５期２０１７年５月 北京中医药大学学报 Ｖｏｌ．４０Ｎｏ．５Ｍａｙ２０１７　 　ＪｏｕｒｎａｌｏｆＢｅｉｊｉｎｇＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙｏｆＴｒａｄｉｔｉｏｎａｌＣｈｉｎｅｓｅＭｅｄｉｃｉｎｅ ３８５  改良三甲散含药脑脊液对脂多糖诱导的ＢＶ２小胶质 细胞炎症模型相关因子及蛋白表达的影响 刘枭　张赓　刘涛＃ （南京中医药大学　江苏２１００４６） 摘要：目的　探讨改良三甲散含药脑脊液对脂多糖（ＬＰＳ）所诱导的ＢＶ２小胶质细胞炎性反应的影 响。方法　将ＢＶ２细胞分为空白对照组，模型组，１０．０％、５．０％、２．５％改良三甲散组，石杉碱甲 组。细胞培养贴壁后，改良三甲散各组及石杉碱甲组分别加入１０．０％、５．０％、２．５％、１０．０％含药 脑脊液，３７℃孵育２ｈ后除空白对照组均加入ＬＰＳ（终浓度为１ｍｇ／Ｌ），继续孵育２４ｈ后收集培养 上清，提取蛋白样品。应用硝酸还原酶法检测各组细胞培养上清中一氧化氮（ＮＯ）的含量；ＥＬＩＳＡ 法检测各组细胞培养上清中诱导型一氧化氮合酶（ｉＮＯＳ）、白细胞介素１（ＩＬ１）、肿瘤坏死因子 β β α （ＴＮＦ）的含量；Ｗｅｓｔｅｒｎｂｌｏｔ法检测各组细胞ｃＪｕｎ氨基末端激酶（ＪＮＫ）、磷酸化ｃＪｕｎ氨基末端 α 激酶（ｐＪＮＫ）的表达。结果　模型组培养上清中ＮＯ、ｉＮＯＳ、ＩＬ１、ＴＮＦ 的含量明显升高，ｐＪＮＫ β α 表达上调；１０％、５％改良三甲散组培养上清中ＮＯ、ｉＮＯＳ、ＩＬ１、ＴＮＦ 的含量明显下降，ｐＪＮＫ表 β α 达下调。结论　改良三甲散含药脑脊液对ＬＰＳ所致的ＢＶ２小胶质细胞的炎性反应具有调节作用， 其作用机制可能与调控ｐＪＮＫ的表达、减少炎性介质的产生有关。 关键词：改良三甲散；ＢＶ２小胶质细胞；脂多糖；ｃＪｕｎ氨基末端激酶；兔 中图分类号：Ｒ２８５５　　　ｄｏｉ：１０．３９６９／ｊ．ｉｓｓｎ．１００６２１５７．２０１７．０５．００６ ＩｎｆｌｕｅｎｃｅｏｆｍｅｄｉｃａｔｅｄｃｅｒｅｂｒｏｓｐｉｎａｌｆｌｕｉｄｏｆｍｏｄｉｆｉｅｄＳａｎｊｉａＳａｎｏｎ ｒｅｌａｔｉｖｅｆａｃｔｏｒｓｏｆＢＶ２ｍｉｃｒｏｇｌｉａｃｅｌｌｉｎｆｌａｍｍａｔｏｒｙｍｏｄｅｌａｎｄｐｒｏｔｅｉｎ  ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎｓｉｎｄｕｃｅｄｂｙｌｉｐｏｐｏｌｙｓａｃｃｈａｒｉｄｅ ＃ ＬＩＵＸｉａｏ，ＺＨＡＮＧＧｅｎｇ，ＬＩＵＴａｏ （ＮａｎｊｉｎｇＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙｏｆＣｈｉｎｅｓｅＭｅｄｉｃｉｎｅ，Ｊｉａｎｇｓｕ　２１００４６，Ｃｈｉｎａ） Ａｂｓｔｒａｃｔ：Ｏｂｊｅｃｔｉｖｅ　ＴｏｉｎｖｅｓｔｉｇａｔｅｔｈｅｉｎｆｌｕｅｎｃｅｏｆｍｅｄｉｃａｔｅｄｃｅｒｅｂｒｏｓｐｉｎａｌｆｌｕｉｄｏｆｍｏｄｉｆｉｅｄＳａｎｊｉａ ＳａｎｏｎｉｎｆｌａｍｍａｔｏｒｙｒｅａｃｔｉｏｎｓｏｆＢＶ２ｍｉｃｒｏｇｌｉａｃｅｌｌｓｉｎｄｕｃｅｄｂｙｌｉｐｏｐｏｌｙｓａｃｃｈａｒｉｄｅ（ＬＰＳ）．Ｍｅｔｈｏｄｓ　 ＢＶ２ｍｉｃｒｏｇｌｉａｃｅｌｌｓｗｅｒｅｄｉｖｉｄｅｄｉｎｔｏｂｌａｎｋｃｏｎｔｒｏｌｇｒｏｕｐ，ｍｏｄｅｌｇｒｏｕｐ，ｔｈｒｅｅｍｏｄｉｆｉｅｄＳａｎｊｉａＳａｎ ｇｒｏｕｐｓａｎｄｈｕｐｅｒｚｉｎｅｇｒｏｕｐ．Ａｆｔｅｒｔｈｅｃｅｌｌｓｃｕｌｔｕｒｅｄａｎｄａｄｈｅｒｅｄｔｏｗａｌｌ，ｍｏｄｉｆｉｅｄＳａｎｊｉａＳａｎｇｒｏｕｐｓａｎｄ ｈｕｐｅｒｚｉｎｅｇｒｏｕｐｗｅｒｅ，ｒｅｓｐｅｃｔｉｖｅｌｙ，