肝细胞向胆管上皮细胞转分化在继发性胆汁淤积性大鼠肝纤维化形成.PDF

中国中西医结合杂志 年月第卷第期 ， ， ， ２０１０ ５ ３０ ５ ＣＪＩＴＷＭ Ｍａｙ ２０１０ Ｖｏｌ． ３０ Ｎｏ．５ ·· ５１３ 肝细胞向胆管上皮细胞转分化在继发性胆汁淤积性大  鼠肝纤维化形成中的作用及黄芪汤组分的干预效应 △１，２ １，２ １，２ １ １，２ 邱冰峰 　 都金星　 申定珠　 陈高峰　 刘　 平 摘要目的探讨肝细胞向胆管上皮细胞转分化在继发性胆汁淤积性大鼠肝纤维化形成中的作用及黄 ７５ ＳＤ ｂｉｌｅ ｄｕｃｔ ｌｉｇａｔｉｏｎ ＢＤＬ 芪汤组分抑制肝纤维化的效应机制。方法 只 雄性大鼠，采用胆总管结扎（ ， ）制 备继发性胆汁淤积性肝纤维化模型，假手术组（ ）仅作胆总管分离，不作胆总管结扎。大鼠 术后 Ｓｈａｍ ＢＤＬ １ Ｍ Ｙ ４ Ｓｈａｍ １ ５ 周随机分为对照组（）与干预组（组，经灌胃给予黄芪汤组分周）， 组于术后周末随机抽取只 Ｍ １ ２ ３ ４ ５ ５ 大鼠处死取材，组分别于术后、、、周末随机抽取只大鼠做动态观察，余下各组大鼠均于术后第周 Ｈｙｐ 末处死取材。观测肝脏组织学及羟脯氨酸（ ）含量；激光共聚焦显微镜观察肝组织胆管上皮细胞标志物 角蛋白（ ）与肝细胞特异性抗原（ ）共定位， 检测 、 的蛋白表达， 软 ７ ＣＫ７ Ｈｅｐ Ｐａｒ Ｗｅｓｔｅｒｎ ｂｌｏｔ ＣＫ７ Ｈｅｐ Ｐａｒ ＩＰＰ 件分析肝组织天狼猩红胶原染色。结果随着造模时间推移，Ｍ 组大鼠肝组织肝细胞Ｈｅｐ Ｐａｒ 阳性细胞逐 Ｓｈａｍ ＞Ｍ１ ＞ Ｍ２ ＞ Ｍ３ ＞Ｍ４ ＞ Ｍ５ ＣＫ７ 渐减少（ 周 周 周 周 周），胆管上皮细胞（ 阳性细胞）及纤维化程度、 Ｈｙｐ ＣＫ７ Ｓｈａｍ ＜Ｍ１ ＜ Ｍ２ ＜ Ｍ３ ＜ Ｍ４ ＜ Ｍ５ ＣＫ７／ Ｈｅｐ Ｐａｒ 含量、 蛋白表达均逐渐增加（ 周 周 周 周 周）， 共定 位细胞于术后１周即见增加，术后３ 周达到峰值，然后渐趋减少，肝组织Ｈｅｐ ｐａｒ 蛋白表达量与ＣＫ７ 蛋白表 达量呈显著负相关，Ｈｅｐ Ｐａｒ 阳性细胞表达量与ＣＫ７ 阳性细胞表达量、胶原沉积程度均呈显著负相关，而 ＣＫ７ 阳性细胞表达量与胶原沉积程度呈显著正相关；与Ｍ 组比较，Ｙ 组大鼠死亡率、ＣＫ７ 阳性细胞、纤维化 程度、肝组织Ｈｙｐ含量、ＣＫ７ 蛋白表达量均显著下降（Ｐ ＜００１），Ｈｅｐ Ｐａｒ 阳性细胞及Ｈｅｐ Ｐａｒ 蛋白表达含量 显著增加。结论肝细胞向胆管上皮细胞转分化可能是继发性胆汁淤