3-2 月季的花药培养模板.ppt

接种是否成功 如果接种的花药长出愈伤组织或释放出胚状体，花药培养的第一步就成功了。要适时转换培养基，以便愈伤组织或胚状体进一步分化成再生植株。 课题成果评价 课后练习1 F2代紫色甜玉米的基因型组成可能为Aasusu或AAsusu。如果运用常规育种方法，将F2代中的紫色甜玉米与白色甜玉米（aasusu）进行测交，可以选择出基因型为AAsusu纯种紫色甜玉米。但这种方法比较繁琐，耗时也较长，需要至少三年的选种和育种时间。如果利用花药培养的技术，在F1代产生的花粉中就可能有Asu的组合，再将花粉植株进行染色体加倍，就可以直接得到紫色甜玉米的纯合体（AAsusu）。这种方法可以大大缩短育种周期。 激素 激素种类和浓度对花药培养的影响 花药壁分化程度高，重新分裂需要较高的激素浓度才能启动。因此，花药培养基的激素水平要相对较低才能抑制二倍体细胞的分裂。 确定适宜的激素浓度，以促使花粉细胞分裂的同时又抑制花药二倍体细胞分裂是成功获得单倍体的关键。 知识拓展： 诱导培养： 多数植物用2,4-D 和KT，但浓度不同。有些植物用BA和NAA。 2,4-D 和KT浓度对诱导单倍体的频率有较大影响，高浓度2,4-D主要诱导花药形成愈伤组织，不能形成胚状体，所以2,4-D激素水平要相对较低。 知识拓展： 3-2 月季的花药培养 一、被子植物的花粉发育 花丝 花药 一、被子植物的花粉发育 一、被子植物的花粉发育 小孢子母细胞 4个小孢子 四分体时期 4个小孢子 单核居中期 4个小孢子 单核靠边期 花粉粒 双核期 花粉母细胞 单核花粉 营养细胞 生殖细胞 精子 被子植物的花粉发育 雄蕊： 花丝 花药：囊状结构，内有很多花粉粒 花粉是小孢子母细胞经过减数分裂而形成的，因此，花粉是单倍体的生殖细胞。 花粉的发育要经历：四分体时期、单核期、双核期 注意： ①二核花粉粒：成熟的花粉粒中，只含花粉管细胞核和生殖细胞核。（精子在花粉管中形成） ②三核花粉粒：有些植物的花粉，在成熟前，生殖细胞进行一次有丝分裂，形成两个精子，这样的花粉在成熟时，含有一个营养核和两个精子。 ③两个精子和一个营养核的基因型相同。 ④ 1花粉母细胞 4个小孢子 减分 有分 4个花粉管细胞核 4个生殖细胞核 有分 8个精子 实例一： 关于被子植物花粉发育的说法，不正确的是（ ） A、花粉粒是在花药中的花粉囊里形成的 B、被子植物精子的形成是直接减数分裂的结果 C、被子植物的花粉的发育要经历四分体时期、单核期、双核期等阶段 D、花粉粒在发育过程中，核先位于细胞一侧，再移到细胞中央 花粉母细胞经减数分裂形成4个单核花粉粒，每个花粉粒的细胞核进行一次有丝分裂形成1个花粉管细胞核和1个生殖细胞核，每个生殖细胞核再进行一次有丝分裂生成2个精子。 BD 二、产生花粉植株的两种途径 二、产生花粉植株的两种途径 花药 胚状体 愈伤组织 丛芽 移栽 丛芽 生根 （二）产生花粉植株的两种途径 ① ② 移栽 花药中的花粉 胚状体 脱分化 愈伤组织 花药中的花粉 脱分化 分化 丛芽 再分化 丛芽 诱导 生根 愈伤组织：在人工培养基上由外植体长出来的一团无序生长的薄壁细胞（细胞排列疏松、无规则）。 （二）产生花粉植株的两种途径 体细胞胚（胚状体）： 在组织培养过程中，某些体细胞在形态上转变为与合子发育成的胚非常相似的结构，发育过程亦与合子胚类似，被称为体细胞胚（胚状体）。 花粉胚形成的小植株 三、影响花药培养的因素 植物类型： 生理状态：花期早期的花药反应能力较好 花粉发育时期：一般而言单核后期花药对培养反应较好 影响花药培养的因素 主要的影响因素：材料的选择与培养基的组成。 (一)材料的选择 （1）接种的花药时期：一般来说，在单核期，细胞核由中央移向细胞一侧时，花药培养成功率最高。选择完全未开放的花蕾，可挑选到单核期的花药，菌少、易消毒；花瓣松动，菌多，消毒困难。 （2）此外，亲本植株的生长条件、材料的低温预处理以及接种密度对诱导成功率都有一定的影响。 (二)培养基的组成 小麦中为N6，马铃薯、月季中为MS，油菜中 为B5培养基. 为什么花瓣松动会给材料的消毒带来困难？ 花瓣松动后，微生物就可能侵入到花药，给材料的消毒带来困难。 实验操作 一、材料的选取 二、材料的消毒 三、接种和培养 一、材料的选取 1、选择花药一般通过镜检来确定其中的花粉是否处于适宜的发育期。 2、确定花粉发育时期最常用方法有醋酸洋红法。但是，某些植物的花粉细胞核不易着色，需采用焙花青-铬矾法，这种方法能将花粉细胞核染成蓝黑色。 注：花粉细胞核内有染色体，染色体主要由DNA和蛋白质组成，醋酸洋红为