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培养细胞的H·E染色1课件.ppt

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培养细胞的H·E染色 H·E染色 苏木精 伊红 1. 4%多聚甲醛溶液 2. 苏木精染液 苏木精0.5g,无水乙醇10mL 硫酸铝钾25g,蒸馏水150mL 完全溶解后,混合均匀,加热煮沸3-5min,加入蒸馏水至500mL,最后加入0.1g碘酸钠 3. 盐酸酒精溶液:0.5mL盐酸、100mL 70%乙醇 4. 淡氨水:0.5mL氨水、100mL自来水 5. 伊红染液:0.5g伊红B、100mL80%乙醇 试剂 镜检:观察并记录细胞状态 吸弃培养基,以PBS溶液(1mL)漂洗1-2次 以固定剂固定15分钟 吸弃固定剂,以蒸馏水洗 加入苏木精染液(1mL,可重复使用)染色十数分钟(随时镜检,以确定染色时间) 以流动的自来水洗 加入0.5%盐酸酒精溶液进行分色(数秒) 以蒸馏水洗 实验步骤(一) 以流动的自来水洗 加入0.5%氨水溶液进行返蓝处理(数十秒) 以流动的自来水洗后观察,效果好则以蒸馏水稍洗 加入伊红染液染色(数秒) 以蒸馏水洗 观察并记录(细胞核呈紫色、细胞质呈粉红色,层次感分明) 实验步骤(二) 注意:每步操作中都应随时镜检 保持湿润 不要直接冲击细胞面 染色结果 整理 拍照后,请将平皿清洗干净后,按要求放置 实验中的废液请倒入废液桶中 实验结束后,请将各种试剂统一收回到最后一条实验台上,托盘中的物品清洗干净后,请放置在原处

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