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用响应面法优化从车前草中提取粗多糖的过程 汇报人：管博文 2019.12.17 英文题目： Optimization of extraction process of crude polysaccharides from Plantago asiatica L. by response surface methodology 作者：叶春林，蒋承俊（浙江科技大学，生物与化学工程系） 期刊： Carbohydrate Polymers 影响因子:3.916 关键词：车前草，多糖，提取，响应面法 摘要： 多糖是通过煎煮的方式从车前草的地上部分提取出来的。 用响应面法基于4因素5水平来优化最大多糖产量。 把实验中获得的数据带入到二阶多项式方程和并用多项回归分析和统计学方法。 最优化的提取条件为提取时间3.9小时，提取温度91℃，提取次数4次，水料比为24。优化后产量为4.37±0.13%，与模型预测值相差甚微。 材料与方法 材料： 车前草的地上部分是从中国安徽省亳州市。 所有化学药剂是分析纯的。 提取粗多糖 选取干燥的车前草地上部分30g进行粉碎，用乙醚（20-40℃）和用80%乙醇预处理两次，用于移除其中的色素。、 用去离子水与预处理的粉末混在一起（混合范围从5:1—35:1）,pH6.5-7.5,水浴温度要保持一个稳定的温度（温度范围从40-100℃），水料凝浆在2L的不锈钢锅炉中不断搅拌（提取（搅拌）时间范围1-7小时）。 之后用4200转/每分钟的离心机离心20分钟，收集上清液，并不容的残留物继续上述的处理（提取（处理）时间范围为1-7小时）。 离心出的上清液用真空旋转蒸发仪以55℃的条件浓缩为初始体积的1/5。浓缩之后用4倍体积的无水乙醇混合并4℃过夜。 之后继续4200转/每分钟的离心机离心20分钟，并用无水乙醇洗涤6次，收集沉淀作为粗提取。 提取物放在50℃下，直到重量维持不变。 提取率用一下这个公式计算： 实验设计和统计学分析 实验用中心合成设计（CCD）来设计四个因素五个水平的试验，四个因素分别为X1：提取时间、X2：提取温度、X3：提取次数、X4：水料比。 整个设计由31个实验点随机组成。其中包括16个因素点，7个中心点和8个轴点，并用于评估纯误差平方和。 多项回归方程的模型是： 其中 xi：独立变量编码值，Xi：独立变量真实值 X0：独立变量在中心点的真实值，Δxi：越阶变化值。 结果与讨论 1不同时间对多糖提取率的影响。 这是由于多糖释放到介质中是需要时间，液体需要扩散进干粉中，并溶解多糖使其扩散出材料。 提取温度80℃，提取次数为3次，水料比为20. 最终认为3-4h为提取多糖最佳时长。 2不同温度对多糖产量的影响 这是由于温度的提高使多糖的溶解度提高了。 提取时间为3小时，提取次数为3次，水料比为20. 最终认为90-100℃为最佳提取温度，但是从工业化生产的角度来看用90℃更加节约成本。 3提取次数对多糖产量的影响 提取温度为80℃，提取时间为3小时，水料比为20. 最终认为5次为最佳提取次数，与之前报道过的一致。 4不同的水料比对多糖产量的影响 这是由于多糖传质的传质驱动力的增加。 提取温度为80℃，提取时间为3小时，提取次数为3次. 最终认为5次为最佳提取次数，与之前报道过的一致。 根据上述的单因子实验，我们采用1-5h的提取时间，60-100℃的提取温度，1-5次的提取次数，10-30的水料比。在这些范围中设定5个水平。如表一。 统计分析和模型拟合 作为优化实验，响应面法比单因子法跟腱节约时间，空间和材料。通过上述的31次实验得出最高的提取率是4.24%，是在提取时间4小时，提取温度90℃，提取次数4次，水料比为25的条件下。再将这些数据输入到design-expert中，带入到多项回归方程模型。最后得出二阶多项式。