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HIV实验室检测 实习生：叶贝 2017/4/28 HIV病原学及流行病学特点 HIV实验室检测方法 罗氏第四代HIV检测试剂特点 目录 HIV病原学 HIV人类免疫缺陷病毒，由包膜及核心组成，为RNA病毒 HIV核心部分包括两条单股RNA链，核心结构蛋白及复制所需酶类（蛋白酶、逆转录酶、整合酶） HIV病毒逆转录酶无校对功能，故病毒变异性强，导致检测结果假阴性 HIV病原学 病毒识别易感细胞膜表面受体，在逆转录酶作用下由RNA逆转录为DNA 经DNA转录及翻译后形成蛋白外壳，将病毒RNA包裹其中，生成新的HIV 主要侵入T淋巴细胞及神经细胞，导致细胞免疫功能缺陷，增加机会性感染 HIV流行病学 全国呈低流行态势，部分地区疫情严重 HIV主要分为两种HIV-1和HIV-2两型； HIV-1类为全球主要流行类型，分为M、 O、N三个亚型组 HIV传播途径 1、传染源：病人及无症状携带者 血液、精子、子宫和阴道分泌物、唾液、眼泪和乳汁等传播 2、传播途径 性传播：同行、异性、双性性接触 母婴传播：经胎盘、分娩及哺乳时传播 血液制品传播：共用针具静脉注射毒品，介入性医疗操作，纹身，耳洞等 HIV感染自然史 急性期 艾滋病期 无症状期 初次感染HIV 2-4周，传染性最强 主要以发热、关节痛、淋巴结肿大为特征 可检出HIV及p24抗原，CD4+/CD8+倒置 可持续6-8年，HIV在感染者体内不断复制，具有传染性 可检测HIV及抗体，CD4+ T淋巴续保逐渐下降 HIV感染最终阶段，HIV血浆病毒载量明显升高，CD4+T淋巴细胞200个/ul 主要表现为各种机会性感染及肿瘤 血清学检测 备注 HIV抗体 筛查试验：ELISA, CIA, ECLIA 确证试验：WB, RIBA 仅测抗体 HIV p24抗原 早期灵敏度更高 HIV抗原+抗体 HIV Ag/Ab combi PT: ELISA, ECLIA, CIA 核酸检测 备注 HIV RNA 定性 辅助确证试验 Taqman荧光实时PCR试剂 HIV RNA 定量 辅助确证试验，监测治疗效果与疾病进展 靶核酸扩增试剂 淋巴细胞检测 备注 CD4+和CD8+ HIV感染分期，抗病毒治疗指针 CD4+/CD8+比值下降 HIV实验室指标 初筛试验+确证试验 HIV检测流程 全国艾滋病检测技术规范-2015年修订版检测流程 初筛试验 筛查 复检 HIV检测流程 全国艾滋病检测技术规范-2015年修订版检测流程 确证试验 确证 仅能检测HIV-1，不能检测HIV-2和HIV Ag，灵敏度有限，窗口期长，易错过早期感染样本 试剂成本高，操作繁琐，结果判定主观 HIV检测流程 初始反应必须使用抗原和抗体联合检测的第四代免疫学方法，这类方法可以同时检测HIV-1抗体、HIV-2抗体和HIV p24抗原，检测出HIV-1、HIV-2感染和急性HIV-1感染，初始检测无反应性则无需进行进一步检测 初始反应阳性标本需经过FDA批准的抗体鉴别试剂进行HIV-1和HIV-2抗体鉴别试验，结果以HIV-1抗体阳性、HIV-2抗体阳性、HIV抗体阳性或无法鉴别来解释 初始检测有反应，抗体鉴别检测无反应性或不明确标本须经HIV-1核酸检测，HIV-1 NAT有反应性而抗体鉴别无反应性为急性HIV-1感染；HIV-1 NAT有反应性而抗体鉴别试验不明确为HIV-1感染；HIV-1 NAT无反应性而抗体鉴别不明确为假阳性结果 联合试验 鉴别试验 核酸试验 美国CDC推荐HIV检测流程 2014修订版 HIV检测 HIV感染后首先检测到HIV RNA 第四代HIV检测试剂检测到HIV p24抗原，为抗原抗体联合检测 第三代及其以前的试剂均为只检测HIV抗体 HIV-1/2/O抗体 HIV-1/2/O抗体+HIV p24抗原 3rd 代抗体检测 核酸检测方法 4th 代抗原抗体检测 周 年 从初始感染后的时间 无症状期 急性期 第一个血清转换窗口期 核酸检测方法 第四代HIV抗原抗体联合检测法 Elecsys ® HIV combi PT 罗氏HIV试剂 艾滋病期 缩短检测窗口期，早期诊断 2nd 代抗体检测 Seroconversion panel Elecsys HIV combi PT Elecsys HIV combi ADVIA Centaur HIV Ag/Ab combo ARCHITECT HIV Ag/Ab combo VIRONOSTIKA® HIV Univ-Form II plus O Zhuhai Livzon