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广东海洋大学硕士学位论文果胶低聚寡糖的酶法制备及其抑菌活性研究 姓名：贺阳洋中请学位级别：硕士专业：食品科学指导教师：秦小果胶低聚寡糖的酶法制备及其抑菌活性研究摘要 果胶是一种以半乳糖醛酸为主要组成单糖的酸性多糖，是植物细胞壁的一种重要组 成成分，广泛存在于果蔬的根、茎和叶中。高分子的果胶一般没有抑菌活性，但是 当果胶降解到一定程度后显示出明显的抑菌活性，可为开发新型天然食品防腐剂开 辟一条新途径，但是目前对其抑菌活性的构效关系尚没有任何报道。本研究以纯化 果胶内切酶为果胶降解酶，以对大肠杆菌、伤寒沙门氏菌、桔草芽他杆菌、八叠球 菌和枯草芽抱杆菌的抑菌活性为指标，在优化了最佳抑菌活性的酶解条件的基础上 ,探讨了果胶低聚寡糖的理化性质与抑菌活性的关系，为果胶低聚寡糖的抑菌机理 提供科学理论依据。研究的主要内容及结果如下： 1、 果胶内切酶的分离纯化及酶学特性研究：利用S e p h a c r y 1 S?3 0 0凝胶柱层析对商品果胶酶进行分离纯化，得到两种酶P G 1和PG 2, T L C结果表明PG 2为内切酶，其最适pH值为4?5 ,最适温度为3 5€。 2、 果胶内切酶酶解产物抑菌活性初探：利用果胶内切酶PG 2对果胶进行酶解， 得到不同酶解率的果胶酶解液。通过比较不同酶解率的果胶酶解液大肠杆菌、伤寒 沙门氏菌、金黄色葡萄球菌、八叠球菌和枯草芽孑包杆菌的抑菌效果，确定了制备果 胶低聚寡糖的最佳条件。结果如下： 果胶内切酶的酶解效果要明显的优于商品果胶酶，其在1 2 0 r a i n时的酶解率 分别为7 2 . 8 3 %和5 8?5 3 %； 果胶本身并没有抑菌钎裕 枪好附庖壕哂蟹浅：玫囊志 畲笠志本 犊纱铮保罚恚恚还耗评忻该附猱梗埃恚掠睿附饴饰罚保扌保志钎宰针浚 ?9 0 m i n果胶内切酶酶解液的抑菌活性要优于食品中常用防腐剂山梨酸钾。 3、 果胶低聚寡糖的分离纯化及其抑菌活性研究：首先利用Sephadex (3 —1 5凝胶柱层析对9 0 m i n时的果胶内切酶酶解液进行分离纯化，得到P F 1 和P F 2两个峰，T L C结果表明，P F 2为果胶低聚寡糖和半乳糖醛酸的混合物 ,P F 1为果胶低聚寡糖和多聚半乳糖醛酸的混合物.P F I的分离纯化及其抑 菌活性研究：首先对PF 1进行抑菌试验，结果发现，其对大肠杆菌、伤寒沙门氏 茵、枯草芽孑包杆菌、金黄色葡萄球菌和八叠球菌均具有非常好的抑菌效果，抑菌圈 直径达到了 2 0 mm以上：利用DEAE — Sephacel纤维素离子交换柱层 析对P F I进行分离纯化，得到T P F 1 , T P F 2 , T P F 3 , T P F 4和TP F 5五个组分，其应为分子量大于1 5 0 0的聚合半乳糖醛酸，抑菌活性随着分子 中半乳糖醛酸残基所占比例的增加而升高。I P F 2的分离纯化及其抑菌活性研究：P F 2对大肠杆菌、伤寒沙门氏菌、枯草芽 也杆菌、金黄色葡萄球菌和八叠球菌也具有非常好的抑菌效果，抑菌圈直径均达到 了 2 2 mm 以上，经过 E io. g e 1 P-2凝胶柱层析后，得到B P F 1和B P F 2两个组分峰，其中B P F 1为聚合 度小于1 0的果胶低聚寡糖，B P F 2为半乳糖醛酸，B P F 1的抑菌效果要优于 半乳糖醛酸BPF 2O关键词：食品防腐剂，果胶，果胶酶，果胶内切酶，果胶酶 解液，抑菌活性，果胶低聚寡糖，分离纯化Studi q seidymatic retcabi tnaant i a c t e r i a 1 n 1 a i 0 n e n z y m a t ic p r e p a r a t ion and a n act ivi ty o f pectic ol igosacchrides Abstract Peet in i s a i 1 important component o f cell 一w all materials of plants. 1 1 1 e structure o f pect inconsists o f a p a r t ? 1 a 1 1 y m e t h y 1 e s t e r i f ? 1 e d p 0 1 y — g a 1 a c t uro n ? 1 c a c i d b a c k b o n e w i th ■ 1 n t e r p 0 s e d L —r h a n i m o s ? e . N o ? w a days, i t w a s d ? 1 s c 0 V e r e d t hat t h e P e :c t ? 1 n h ydrolysate w 0 u 1 d r