新型蛋白质配体鄄亲和体研究进展-生物化学与生物物理进展.PDF

生物化学与生物物理进展 Progress in Biochemistry and Biop hys ics 2012, 39(2): 137~ 141 新型蛋白质配体 亲和体研究进展 李爽 郝志明* ( 安交通大学医学院第一附属医院，西安7 10061) 摘要 亲和体(affibody)是一种衍生于葡萄球菌A 蛋白B 结构域的人工蛋白质分子 B 结构域含58 个氨基酸，形成3 个 螺 旋结构，分子质量约为6.5 ku 其中第一及第二螺旋中的13 个特定位点的氨基酸对其结构无明显影响，这些位点可被随机 突变形成理论上可与任何靶分子结合的亲和体文库 筛选该文库可获得能与某一靶分子特异结合的亲和体 亲和体与靶分子 的结合特性与抗体相似，但与抗体相比具有一些 特的优势，如：通过体外筛选即可获得，以化学合成方法或原核表达即可 大量制备，分子质量小、在生物体内组织穿透性强、血浆清除率高，理化稳定性好，可以通过交联或融合表达与标记分子 (如荧光蛋白、生物素等)结合而不影响其与靶分子的结合能力 亲和体可作为抗体的替代品，用于蛋白质识别、分离及纯化、 实验诊断、分子显像及靶向治疗 关键词 亲和体，人工突变，体外筛选，分子影像学 学科分类号 Q7 DOI: 10.3724/SP.J.1206.20 11.00269 亲和体 (affibody) 是葡萄 菌 属蛋白 A 皮生长因子受体 2 (human epidermalgrowth factor (staphylococcal protein A ，SPA) B 结构域的人工突 receptor-2，HER2) 、肿瘤坏死因子(tumor necrosis 变体，具有与其他蛋白质结合的能力，是一种新型 factor- ，TNF ) 、 淀粉样肽(amyloid- ，A )、 茁 茁 茁 的蛋白质配体[1] SPA 是A 型金黄色葡萄球菌的一 IL-8、gp120、CD28 、IgA、IgE 及IgM 等多种蛋白 [5] 种细胞壁蛋白，含有S、E 、D、A 、B 、C、X 等7 质的亲和体 亲和体的骨架结构及已筛选出的 个结构域，其中B 结构域含58 个氨基酸，形成3 A茁、TNF 、HER2、EGFR 、PDGF、HER3 蛋白质 个 螺旋结构，分子质量约为6.5 ku ，是介导SPA 分子的亲和体为Affibody 公司的专利产品 由于 与IgG(IgG3 除外) 的Fc 段结合的主要功能片段[2] 亲和体来源于Z 结构域，因此以 “Z ”命名，如 SPA 与IgG Fc 段结合并不干扰Fab 段与抗原结合， HER2 亲和体命名为ZHER2:4，其中 “4 ”代表克隆序 可形成A 蛋白- 抗体- 抗原复合物，常用于识别及 号；HER2 亲和体二价体命名为(Z ) ；若在亲和 HER2:4 2 [3] 分离IgG 1995 年瑞典学者Nord 等 合成B 结构 体氨基端融合白蛋白结合结构域(ABD)，则命名为 域核酸序列，改称为Z 结构域，Z 结构域的第一及 ABD- ZHER2:4 第二螺旋结构中特定的13 个位点(Q9，Q10，N 11， 亲和体在特异性及亲和力等方面与抗体相似， F13