枯草芽孢杆菌的培养、筛选分离与鉴别.pptxVIP

—— 培养、筛选分离和鉴别 —— 枯草芽孢杆菌 汇报人： 目 录 CONTENTS 枯草芽孢杆菌的简介 01 枯草芽孢杆菌 枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)，是芽孢杆菌属的一种。单个细胞0.7~0.8×2~3微米，着色均匀。无荚膜，周生鞭毛，能运动。革兰氏阳性菌，芽孢0.6~0.9×1.0~1.5微米，椭圆到柱状，位于菌体中央或稍偏，芽孢形成后菌体不膨大。菌落表面粗糙不透明，污白色或微黄色，在液体培养基中生长时，常形成皱醭。需氧菌。可利用蛋白质、多种糖及淀粉，分解色氨酸形成吲哚。在遗传学研究中应用广泛，对此菌的嘌呤核苷酸的合成途径与其调节机制研究较清楚。广泛分布在土壤及腐败的有机物中，易在枯草浸汁中繁殖，故名。 芽孢杆菌是土壤和植物微生态区系的优势微生物种群，有很高的抗逆能力和抗菌防病作用。 美蓝染色100倍油镜下的枯草芽孢杆菌 枯草芽孢杆菌的作用机理 3 2 1 4 1. 枯草芽孢杆菌菌体生长过程中产生的枯草菌素、多粘菌素、制霉菌素、短杆菌肽等活性物质，这些活性物质对致病菌或内源性感染的条件致病菌有明显的抑制作用。 2. 枯草芽孢杆菌迅速消耗肠道中的游离氧，造成肠道低氧，促进有益厌氧菌生长，间接抑制其它致病菌生长。 3. 刺激动物(人体)免疫器官的生长发育，激活T、B淋巴细胞，提高免疫球蛋白和抗体水平，增强细胞免疫和体液免疫功能，提高群体免疫力。 4. 枯草芽孢杆菌菌体自身合成α-淀粉酶、蛋白酶、脂肪酶、纤维素酶等酶类，在消化道中与动物体(人体)内的消化酶类一同发挥作用。 枯草芽孢杆菌的应用范围 枯草芽孢杆菌对水产中的弧菌、大肠杆菌和杆状病毒等有害微生物有很强的抑制作用，有效预防水产动物肠炎，烂鳃等疾病。分泌大量几丁质酶的功能，几丁质酶可分解病原真菌的细胞壁而抑制真菌病害，分解养殖池中的有毒有害物质，净化水质;分解池中残饵、粪便、有机物等,具有很强的清理水中垃圾小颗粒的作用; 枯草芽孢杆菌可以减少对虾病害发生，可以大大提高对虾产量，从而提高经济效益，生物环保，刺激水产动物免疫器官的发育，增强机体免疫力;减少对虾病害发生，明显提高对虾产量，从而提高经济效益，净化水质，无污染，无残留。 枯草芽孢杆菌能够改善有害蓝藻泛溢造成的水质浑浊问题，水质由浑变清，具有很强的净化水质功能，具有较强的蛋白酶、脂肪酶、淀粉酶的活性，促进饲料中营养素降解，使水产类动物对饲料的吸收利用更加充分; 生物科学 进入人体，能100%到达大小肠，抑制致病菌，促进有益厌氧菌生长，并产生乳酸等有机酸类，降低肠道PH值，间接抑制其它致病菌生长。提高免疫球蛋白和抗体水平，增强细胞免疫和体液免疫功能，提高群体免疫力。合成α-淀粉酶、蛋白酶、脂肪酶、纤维素酶等酶类，在消化道中与动物体(人体)内的消化酶类一同发挥作用。 枯草芽孢杆菌的培养 02 培养基的配制及灭菌 枯草芽孢杆菌的筛选分离 03 枯草芽孢杆菌的分离纯化 2 4 1 3 在超净工作台中，将装有锥形瓶的菌悬液加塞、包扎、摇匀后放入 9O℃恒温水浴锅中，水浴 20min，制成编号为 1O一2g／mL的土 壤悬液。后稀释成不同浓度的悬液备用。 加热筛选能形成芽孢的细菌 挑取单菌落在培养基上37℃培养，采用平板划线法分离纯化，直到不再出现杂菌为止。 纯化 用移液枪将各个浓度梯度的一定量稀释液接种到开始时制作好的培养基上，用无菌刮铲涂匀。37℃下倒置培养24小时。 培养 取得土壤样g，放入盛有99ml的无菌水锥形瓶中，充分振荡。 制样品稀释液 枯草芽孢杆菌的鉴定 04 枯草芽孢杆菌的鉴定 鉴定 内容 挑选疑似枯草芽孢杆菌菌落的菌体，进行稀释，接种。 37℃下隔夜培养12小时，稀释、涂片，进行革兰氏染色， 然后放入显微镜下观察 内容 进 行 革 兰 氏染 色 和孔 雀 石 绿 芽孢 染 色 ，在显微镜 下观 察 革 兰 氏染 色 情况及 生 芽孢情 况 。 个体形态 —— —— 谢谢你的观看 汇报人：