铜绿假单胞菌的耐药.PPTVIP

药物作用靶位的减少或缺失甚至由于抗生素压力等引起靶位突变均可导致药物与细菌的亲和力下降甚至丧失，从而使细菌逃避抗菌药物的抗菌作用。 PBPs是一组位于细胞内膜的蛋白质，参与合成细菌细胞壁肽聚糖、保持细胞壁正常形态及功能。PBPs本质上是转肽酶、羧肽酶或糖基转移酶。 PA中的AmpC酶是典型的诱导酶。通常AmpC酶表达水平很低，可以水解氨基青霉素和大部分早期的头孢菌素。然而，当大量使用β-内酰胺类抗生素（尤其亚胺培南）时，PA染色体中的AmpC酶的表达水平可能提高100-1000倍。正常情况下，PA中染色体介导的β-内酰胺酶的合成受基因阻遏物的控制，只产生少量的基础水平的β-内酰胺酶，当PA接触β-内酰胺酶的诱导剂时， β-内酰胺酶的基因去阻遏，表达增加，产生大量的诱导型β-内酰胺酶，即AmpC酶，因而这类酶又叫诱导酶。目前，PA中尚未发现含有质粒介导的AmpC酶。 生物膜耐药机制（1）①EPS通过屏障作用阻碍了抗生素的渗透，使抗生素无法作用于菌体；②EPS还可阻止化学反应性杀菌剂的活化；③位于BF深部的细菌因养分和氧气不足，代谢废物也不能及时清除，细菌代谢活动低，甚至处于“亚冬眠状态”，对抗生素等外界刺激的敏感性降低；④因抗生索无法杀灭底层菌细胞，使其有足够的时间开启抗生素耐药基因，导致抗生素降解酶基因大量表达。如糖被膜含有较高浓度的β-内酰胺酶等；⑤BF阻止机体免疫系统对细菌的清除，减弱机体免疫力与抗生索的协同杀菌作用；当停用抗生素时，这些细菌可再次游离到被膜外，引起感染反复发作；⑥BF中菌体密度的增加引起密度阈值感应系统(quorumsensing，QS)的激活，QS在PA产生BF的过程中起着重要作用，不仅影响EPS的合成，而且通过调节σ因子Rpos的合成控制BF的综合应激反应(gemralstress北sponse，GSR)。GSR的激活使细菌对环境压力，如养分不足、DNA损害、渗透压和温度变化以及氧化作用等的抵抗性增强，⑦BF内的环境因素诱导或选择了表型变异的、具有顽固耐药表型的菌株，使BF内细菌对高浓度抗生紊耐药。 铜绿假单胞菌耐药研究进展 1.铜绿假单胞菌的流行病学、病原学、临床意义2.铜绿假单胞菌的实验室检查3.铜绿假单胞菌感染的治疗方案4.铜绿假单胞菌的耐药机制5.研究进展 主要内容 流行病学 本菌为条件致病菌，广泛存在于自然界、土壤、水、空气，在正常人皮肤（如腋下、会阴部和耳道内）、呼吸道和肠道均存在。 其生存的重要条件是潮湿环境，对外界环境抵抗力较强，湿热55℃ 、1h方能杀灭，对紫外线不敏感。 儿童带菌率比成人高,应用抗生素治疗者带菌率增高。 住院病人，特别是使用抗生素、糖皮质激素或免疫抑制剂治疗的病人，呼吸道内该菌的寄植增多。 流行病学 感染途径： 内源性：自身上呼吸道、肠道、皮肤、生殖道等 外源性：其他病人或带菌的健康工作人员，经手、飞沫或污染的医疗器械而传播。 病原学 革兰氏阴性杆菌，单个、成对或短链状排列。 多数菌株分泌绿脓菌素和荧光素，呈蓝绿色，故名绿脓杆菌。 菌体一端有1～3根鞭毛，故有动力，较活泼，无荚膜或芽胞。 专性需氧菌，生长要求不高，在普通培养基上生长良好，最适宜温度为35℃。 有很强的蛋白分解能力，但发酵糖类能力低。 致病性 致病物质 生物学活性 菌毛 对宿主细胞具有粘附作用 荚膜多糖（藻酸盐 ） 抗吞噬作用 毒素 内毒素 致发热，休克，DIC等 外毒素A 抑制蛋白质合成 细胞溶解毒素 有杀白细胞素等，能损伤细胞和组织 蛋白分解酶 分解蛋白质，损伤多种细胞和组织 胞外酶S 人类肺部感染的重要因子 弹性蛋白酶 损伤血管，抑制中性粒细胞功能 碱性蛋白酶 损伤组织，抗补体，灭活IgG，抑制中性粒细胞功能 磷酸酯酶C 组织损伤 临床意义 经常引起术后伤口感染，也可引起褥疮、脓肿、化脓性中耳炎等。本菌引起的感染病灶可导致血行散播，而发生菌血症和败血症。烧伤后感染了铜绿色假单胞菌可造成死亡。 本菌所致感染的临床表现取决于受累部位。 化脓性内眼炎 继发性铜绿假单胞菌感染 脓液 痰 尿液等 血液 环境用品 分离培养 直接涂片染色 肉汤增菌 血平板、MAC 37 ℃18-24h