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肺结核患者分枝杆菌感染菌型鉴定结果分析
邯郸市传染病医院检验科(056002) 李爱英
贵阳医学院(550004) 范洁
分枝杆菌属(Mycobacterium)是一类细长略带弯曲的杆菌,有分枝生长的趋势而得名。本属细菌大多数具有抗酸性,即一般染色细菌不易着色,一旦着色后能抵抗盐酸酒精的脱色作用,故又称抗酸杆菌(acid-fast bacillus)。本菌属种类颇多,现已被鉴定的有70余种。(1)结核分枝杆菌(Mycobacteriumtuberculosis)复合群包括人结核分枝杆菌(M.tuberculosis),牛分枝杆菌(M.bovis),非洲分枝杆菌(M.africanum)和田鼠分枝杆菌(M.microti)等,其中前三者对人类致病。(2)非典型分枝杆菌是指结核分枝杆菌和麻风分枝杆菌以外的分枝杆菌。因其在染色上具有抗酸性,故又称非典型抗酸性菌。此类细菌广泛分布予外界环境和正常人及动物机体中。目前,世界上已发现17种以上的其他分枝杆菌能引起人类的疾病,引起世界各国的重视【1】。由于非典型分枝杆菌引起的肺部感染在临床上难以与结核分枝杆菌感染区别,其临床治疗用药相差很大,甚至完全不同【2】而此类杆菌多数对常用抗生素和抗结核药物耐药,因此,区分鉴别非典型分枝杆菌具有重要的意义。统计了2007年1月~2010年12月我院肺结核患者痰培养结核杆菌阳性的标本135株,现将分型鉴定结果进行分析如下。
1 资料与方法
1.1一般资料 135株痰标本为我院2007年1月~2010年12月三年间,肺结核患者痰培养结核杆菌阳性的标本。男性患者83株,女性患者52株;其中空洞病人56株。
1.2鉴定方法
经抗酸染色后镜检 确定为抗酸杆菌的培养阳性菌株,首先接种改良罗氏培养基进行增菌传代。
进行分枝杆菌菌种鉴定 首先经对硝基苯甲酸(PNB)生长试验、28℃生长试验、耐热触酶试验、观察记录细菌的生长速度、菌落形态和菌落颜色等来确定该菌株为结核分枝杆菌复合群或非结核分枝杆菌。经菌群鉴定试验确定属于结核分枝杆菌复合群的菌株,再进行噻吩-2-羧酸肼(TCH)培养基生长试验、硝酸还原试验和烟酸试验进行菌种鉴定。属于NTM的菌株,首先根据生长速度确定属于快速生长还是缓慢生长的分枝杆菌。快速生长的分枝杆菌可通过生长特征和生化实验进行菌种鉴定;缓慢生长的分枝杆菌经色素产生试验确定菌株的产色特征后,再通过生长特征和生化试验确定菌株的种类【3】。
2结果
肺结核病人痰结核菌培养阳性的标本135株中,人结核分枝杆菌126株,为93.3%;牛分枝杆菌2株,为1.5%;非典型分枝杆菌7株,为5.2%。见表1。
表1 肺结核分枝杆菌感染菌型鉴定结果
菌 型
菌株数
%
人分枝杆菌
126
93.3
牛分枝杆菌
2
1.5
非典型分枝杆菌
7
5.2
合计
135
100
3讨论
结核分枝杆菌简称为结核杆菌,是引起结核病的病原菌。可侵犯全身各器官,但以肺结核为最多见,我国以人分枝杆菌感染多见,其次为牛分枝杆菌。结核病至今仍为重要的传染病。随着抗结核药物的不断发展和卫生生活状况的改善,结核的发病率和死亡率曾一度大幅下降。20世纪80年代后,由于艾滋病和结核分枝杆菌耐药菌株的出现、免疫抑制剂的应用、吸毒、贫困及人口流动等因素,全球范围内结核病的疫情骤然恶化。据WHO统计,全世界约每3个人中就有1个人感染了结核分枝杆菌,在某些发展中国家成人中结核分枝杆菌携带率高达80%,其中约5%~10%携带者可发展为活动性结核病。结核病的症状和体征往往不典型,虽可借助X-线摄片诊断,但确诊仍有赖于细菌学检查。标本直接涂片或集菌后涂片,用抗酸染色,若找到抗酸阳性菌即可初步诊断。分离培养,结核分枝杆菌生长缓慢,一般需2~4周长成肉眼可见的菌落。液体培养,则可于1~2周在管底见有颗粒生长。取沉淀物作涂片,能快速获得结果,并可进一步作生化、药敏等测定和区分结核分枝杆菌与非结核分枝杆菌。
非结核分枝杆菌主要见于水、土壤和气溶胶,由于地理、气候、环境、经济、文化、医疗水平等不同,各国非结核分枝杆菌病的流行情况各异。近年来非结核分支杆菌病的发病率有明显上升趋势【4】,从目前情况来看,非结核分枝杆菌病在一定时间内不会对人类的健康构成很大威胁,但对其诊断和治疗方面的研究应予重视。关于非结核分枝杆菌院内感染的暴发流行,近年国内湖南省常德市、深圳市、福建省南平市以及河北省辛集市也相继发生因注射、手术引起非结核分枝杆菌院内感染。非结核分枝杆菌院内感染的主要传播途径是对污染的医疗用品和器械的接触感染,水是主要的传染源。因此,预防和控制非结核分枝杆菌院内感染的中心环节是消毒灭菌。非结核分枝杆菌病的临床表现虽有一些特点,但确诊仍需细菌培养与鉴定。由于
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