第4章-微生物发酵过程-2018-10-17.pptVIP

变量 测量方法 测量原理 测定意义及作用 生物量 浊度法 荧光法 入射光细胞散射衰减 细胞NADH被紫外激发 了解菌生长情况 基质和代谢物浓度 高效液相色谱（HPLC） 溶质在固定相和流动相两相间进行分配并分离 了解生长和产物合成情况 DNA、RNA 含量 光密度测定法 DNA和RNA在260nm处有一很高的吸收峰 了解菌生长繁殖情况 ATP、ADP、AMP 高效液相色谱（HPLC） 溶质在固定相和流动相两相间进行分配并分离 了解菌能量代谢情况 NADH 化学测定 NADH在340nm波长处 有吸收峰 了解发酵液氧化还原状态、细胞代谢活性 摄氧率 间接计算 根据进气和排气氧的 溶解量进行计算 了解耗氧速率 呼吸商 间接计算 根据氧含量和二氧化碳含量的变化进行计算 了解菌的代谢途径 氧化还原电位 传感器 电极与发酵液之间 产生电位差 反映菌代谢情况 浊度 传感器 细胞密度与吸光值 之间的关系 反映菌生长状况 比生长速率（?） 间接计算 单位重量细胞在单位时间 内增加的量 了解细胞生长情况 呼吸强度 间接计算 单位重量细胞对氧气的利用 了解比耗氧速率 细胞形态 射像显微镜 显微射像技术 了解菌生长情况 发酵过程变量检测指标（二） 2. 发酵终点判断:  生产率:kg/m3?h; 得率:kg产物/kg基质(转化率); 发酵系数:kg产物/罐容积m3?发酵周期 h3. 放罐时间的确立考虑的因素: 1) 提高发酵生产率，降低成本，不影响产品取质量; 2) 放罐前的控制;3) 发酵异常的处理 a）发酵液转稀，粘度下降，泡沫上升，消沫效果减弱。原因: 噬菌体侵染或其它未知因素；措施：不严重补入适当碳源或氮源促使繁殖新菌体，严重需停止发酵甲醛熏蒸 b）发酵液过浓。原因：氮源过多，菌体过剩，溶解氧下降; 措施：补入10%无菌水，使菌液浓度下降，粘度下降，改善发酵条件。 C）耗糖缓慢。原因：种子质量，灭菌质量，磷盐浓度低。 措施：补入适量合适的氮源，磷盐，提高发酵温度，风量； d） pH不正常。原因：灭菌质量，原料质量，水质，通气，补料； 措施：酸或碱调整。 菌体形态: 种子阶段：掌握合适种令，确保优质种子； 发酵阶段：观察生长是否正常，以便选择合适发酵条件如果发现不正常，则设法补救，及时发现杂菌污染，及早控制或处理。 六. 主要技术经济指标 1. 发酵率：表示发酵过程中化学及生化反应的动态变化，几种重要的物质变化速率。即：基质消耗、菌体生长和终点产物浓度改变的瞬时速率。 2. 发酵率的测定：发酵率的测定一般着重在菌体生长、基质利用和产物的形成三个方面，即发酵率是由“生长率”，“代谢率”和“生产率”组成。 (1) 生长率以菌体生长代表各种酶的总催化活力(μ), g/g?h (2) 代谢率表示菌体代谢变化情况(Qc, Qs, QO2), g/g?h (3) 生产率是以发酵时间除最后产物浓度之商，Qp g/g?h 3. 发酵率的表示 发酵率可以以体积为计量单位，表示浓度（单位体积的产物量）随时间变化速率，称为“体积率”，其单位是产物量/体积 时间。发酵率还可以菌体量作为单位，称为“比速率”，其单位为菌体量/单位菌体量 时间，用作发酵动力学分析。 常见的具体技术经济指标有： （1）容量产率单位时间内单位反应器的产物量 (g产物/L?h) （2）转化率单位底物产生的产物量 (%)(kg产物/kg基质) （3）产物浓度单位体积发酵液所含的产物量 (g/L?%) 六. 主要技术经济指标 发酵率 (fermentation rate) 表示发酵过程中化学及生化反应的动态变化，即表示几种重要物质的变化速率，也就是过程中基质的消耗、菌体生长和终点产物浓度改变的瞬时速率。发酵率是由生长率和代谢率 (metabolism rate) 以及生产率组成。 生长率：是用菌体生长代表各种酶的总催化活力。测定菌体生长的方法虽然较多且较容易，但也只是酶活力的一个粗略代表，用以估计发酵过程的推动力。 代谢率：表示代谢变化的情况。菌体生长和产物合成都需要能量，一般以碳的利用率来代表能量释放的速率，也可以通过测定各种氮源及代谢产物的变化来了解发酵过程的内在变化情况。 生产率：是以发酵时间除最后产物浓度的商。 体积率：发酵率可以以体积为计量单位，表示浓度（单位体积的产物量）随时间的变化速率，称为体积率其单位是产物量/体积·时间，因其中具有体积的涵义，故适用于设备设计的计算。 发酵率还可以用菌体量作为单位