分子生物学15 考研笔记 中山大学.pptVIP

五、转录后的基因表达调控 3. rRNA与tRNA的加工 （1）rRNA的加工 真核生物rRNA基因的结构 在基因组中成簇分布，一般串联式重复数百次（脊椎动物） The repeating unit and the transcription unit of human rRNA genes 五、转录后的基因表达调控 3. rRNA与tRNA的加工 （1）rRNA的加工 真核生物rRNA前体的加工 转录单位转录出来的rRNA前体，要在核仁中进行加工，参与加工的有内切酶、外切酶、核仁小分子RNA（snoRNA）等 Processing scheme of human rRNA precursor 五、转录后的基因表达调控 3. rRNA与tRNA的加工 （1）rRNA的加工 原核生物rRNA前体的加工 与真核生物rRNA前体的加工有一定的相似性，不过原核rRNA基因一般以操纵子的形式存在，且整个基因组只有几套（E. coli有7套） 参与加工的有RNase III、 RNase E等 Processing of bacterial rRNA precursor 五、转录后的基因表达调控 3. rRNA与tRNA的加工 （2）tRNA的加工 在真核生物中， tRNA前体含单个tRNA分子，两端有额外的序列，其加工是要除去这些额外的序列 在原核生物中， tRNA前体含1至多个tRNA分子，或与rRNA前体混在一起，故其加工首先要把含单个tRNA分子的片段切割出来（由RNase III负责），然后再除去5’及3’ 端额外的序列 五、转录后的基因表达调控 3. rRNA与tRNA的加工 （2）tRNA的加工 真核生物与原核生物tRNA 5’ 端的加工成熟 由RNase P负责，一次切割即除去5’端的额外的序列 RNase P含有2个亚基，一个是RNA（M1 RNA，125 kD），另一个是蛋白质（14 kD），而起催化（酶切）作用的是RNA这个亚基 RNase P action The M1 RNA of RNase P has enzymatic activity 五、转录后的基因表达调控 3. rRNA与tRNA的加工 （2）tRNA的加工 真核生物与原核生物tRNA 3’端的加工成熟 有6种RNase参与 RNase D RNase BN RNase T RNase PH RNase II PNPase (polynucleotide phosphorylase, 多核苷酸磷酸化酶) PNPase、 RNase PH 和 RNase T最为重要 Model for processing the 3’-end of an E. coli tRNA 五、转录后的基因表达调控 4. 反式剪接（trans-splicing） （1）顺式剪接（cis-splicing）与反式剪接 顺式剪接：所有参与剪接的外显子都在同一个基因中（同一个RNA分子中） 反式剪接：参与剪接的外显子并不在同一个基因中（即在不同的RNA分子中） 反式剪接只在某些生物中发现 Some organisms that trans-splice 五、转录后的基因表达调控 4. 反式剪接（trans-splicing） （2）锥虫中的成熟mRNA 在锥虫中，成熟mRNA的5’端都有一段35 nt的序列（前导序列，spliced leader, SL），而这一序列在相应的mRNA基因中是不存在的 该前导序列是由另一个基因编码——编码前导序列加上含有 5’端剪接信号（相当于内含子 5’端）的一段序列 五、转录后的基因表达调控 4. 反式剪接（trans-splicing） （2）锥虫中的成熟mRNA 解释锥虫中把前导序列连接到各个mRNA 5’端的2种假说 前导序列转录后，作为引物，用于其他mRNA基因的转录，形成连在一起的前体，然后剪接 前导序列与其他mRNA分别转录，然后再通过反式剪接连在一起 Two hypotheses for joining the leader to the coding region of an mRNA 五、转录后的基因表达调控 4. 反式剪接（trans-splicing） （2）锥虫中的成熟mRNA 实际上发生的是通过反式剪接把前导序列连接到各个mRNA的5’端（有Y形中间产物的存在） 五、转录后的基因表达调控 4. 反式剪接（trans-splicing） （3）反式剪接的机制 Treating hypothetical splicing intermediates with debranching enzyme that breaks 2’-5’ phosphodiester bond Release of t