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眼部细菌学检验的标准化建议 王文琴(广西水电医院检验科 530219) 【中图分类号】R446 【文献标识码】A 【文章编号】2095-1752 (2013) 26-0375-02 一、 眼标木中可能发现的细菌 从眼的解剖学分析，人类体表皮肤及与外界相通的腔道和经常暴露在空 气中的部分，习惯上称为外眼。它们包括眼睑、泪囊、结膜、角膜、巩膜等。由 于眼泪具有机械的冲洗作用，同时乂含有杀菌物质(如溶菌酶)，故泪囊、结膜、 角膜、巩膜和前房等通常应是无菌的。但由于某种原因也可致一些细菌的侵入。 眼标木中可能发现的细菌参见下表： 眼标木中可能发现的细菌 革兰阳性革兰阴性 球菌 葡萄球菌、链球菌、肺炎链球菌 卡他布朗汉菌、淋菌奈瑟菌 杆菌类白喉棒状杆菌、枯草芽胞杆菌、白喉棒状杆菌、结膜干燥杆菌、 梭状杆菌、麻风分枝杆菌铜绿假单胞菌、大肠埃希菌、流感嗜血杆菌、肺炎克 雷伯菌 其它沙眼衣原体、病毒、螺旋体、真菌 二、 标木采集与运送 眼标木的采集应在可以安全的获得样木的情况下从被感染的位置收集 标木，任何可获得的脓液和感染部位的分泌物都可做为标木。采集时无菌手续以 无菌试子采集病变明显处的脓性分泌物或排出物。采取后拭子应置于Stuarts运 送培养基或Culture-swab运送，以防干燥。并在标木上标明左眼(O.S)或右眼 (O.D),立即送检，如不能及时送检，应置于4°C冰箱保存，超过48h不可使用。 1、结膜标木： 刮片：表面麻醉，翻转眼睑，暴露结膜，以消毒刮片或虹膜恢复 器垂直睑结膜面，轻轻取上皮细胞层。可在不同部位刮取，但不要在同一部位反 复刮取。 （2）结膜囊标本：无菌手续以浸肉汤的消毒试子，在内1/3下穹隆轻 擦试子并旋转360度，而后将试子插入运送管中，2h送检。取标本时无菌试子 切勿接触毛和睑缘皮肤（防止正常菌群污染） 2、 角膜标本: 刮片：表面麻醉，用手或开睑器分开眼睑，令眼球固定不动或用固定银 固定，用消毒刮刀或虹膜恢复器45度角刮取角膜溃疡边缘或进行缘，切勿刮取 角膜溃疡之基底部。如怀疑真菌感染吋可刮取基底部，但不宜过深。 3、 泪囊标本： 以无菌棉签轻压下睑鼻侧部分（泪囊区），并向泪小点方向推挤，同吋 以浸过肉汤的试子擦取泪小点溢岀的脓性分泌物，而后将试子插入运送管中，2h 内送检。 三、 注意爭项： 1、 病的种类不同，标本的采集也有所不同，但都必须注意无菌操作技 术。 2、 怀疑淋球菌感染时，应在病人床边留取标本后直接接种于相关培养 基并立即置孵箱，运送吋间要尽可能短。 3、 怀疑厌氧菌感染时，应将标本立即接种，并送厌氧培养。 4、 标本应尽可能在感染早期和未用抗生素处理前留取，立即送检，因 为某些病原菌仅在病的早期可见，否则不易获得阳性结果而失去诊断意义。 5、 对于治疗过或用过药物冲洗过的患者，最好在12?24h后采集标本， 以避免药物影响。 四、 标本验收 1、申请单填写完整，应注明标本采集时间、来源、标本标识与清单相 符，标识唯一。 2、标本采集应使用规定的拭子与运送管。 3、 拭子应置于运送培养基内，留取时间不得超过2h。 4、 有严格的生物安全防护，标本不能外泄，沾染申请单和容器。 5、 如遇与以上不符标本，必须及时与临床联系，并报告不合格标本拒 收的理由，同时记录。 五、实验室检验 镜检 1、 直接镜检：取硬性下疳及疑为二期梅毒病灶分泌物，直接涂片，墨 汁染色湿片在显微镜下检查，如见有活泼运动的密螺旋体或光亮的小螺旋体，可 结合临床症状进行判断为梅毒螺旋体。 2、 涂片镜检 一般细菌：以无菌试子采取眼分泌物或刮取物直接涂片，革兰染 色后显微镜镜检，根据细菌形态，染色特征，既可做出初步报告：“直接涂片检 查见革兰times;性times;菌，形似times;times;菌”。 淋病奈瑟菌：取棉拭子标本涂于玻片上，以革兰氏染色后显微镜 镜检，如查见有革兰氏阴性形态典型的双球菌，在细胞内(或细胞外)，可初步 报告：“找到革兰氏阴性双球菌，在细胞内(或细胞外)，开似淋病奈瑟菌。 、沙眼衣原体：标本采取后，涂片、自然干燥，甲醇固定1?5min, 空气中风干后加稀释的姬姆萨染色液染色15?24h后，蒸徭水冲洗，镜检，包涵 体呈蓝色、深蓝色或暗紫色。 、真菌：将拭子标本涂于洁净的玻片上，加生理盐水或棉蓝染液一 滴，并盖上盖玻片，以高倍镜观察。根据菌丝、砲子等特点得出初步报告。 、抗酸菌：取棉拭子标本涂于玻片上，以抗酸染色后显微镜镜检, 如查见有抗酸菌，可初步报告找到抗酸菌。 细菌分离培养 1、培养基选择和标本接种：根据标本来源及临床诊断选择适合的培养 条件。 一般培养：将眼分泌物拭子或眼分泌物一接种环以无菌手续，分 别接种于血琼脂平板(BAP)和麦康凯(中国兰)；同时肉汤(TSB)增菌，置35? 37度环境