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Ⅰ花粉活力的测定及花粉管萌发的观察Ⅱ种子活力的快速测定 实验目的 1、学会运用I2-KI染色法测定花粉活力;观察花粉管的萌发。 2、掌握用红墨水法测定种子活力的原理和方法。 Ⅰ花粉活力的测定及花粉管萌发的观察 一、实验原理 成熟花粉粒中积累有淀粉,用I2-KI可将其染成蓝色,而发育不良的花粉常呈畸形,不积累淀粉,不能被染色或着色较浅;成熟花粉具有较强的活力,在适宜的条件下就能萌发出花粉管。多种植物花粉能在含10%蔗糖、100ppm硼酸的花粉培养基上萌发,在显微镜下可观察花粉管的伸长。 二、实验材料、试剂及用具 1.仪器设备:显微镜、载玻片及盖玻片、解剖针、镊子 2.试剂:I2-KI溶液、花粉培养基(10ppm的硼酸+10%蔗糖) 3.材料:山茶花 三、实验步骤 1. 取一花药置于载玻片上,加一滴蒸馏水后,用镊子将其充分捣碎,再加1~2滴I2-KI,盖上盖玻片后于低倍镜下观察花粉成熟状况; 2. 取1~2滴花粉培养液于另一凹面载玻片的凹陷处,再将花粉粒少许撒落于培养液中,盖上盖玻片后放置30分钟左右,观察花粉管的萌发情况。 有活力的花粉 山茶花花粉管的萌发 四、注意事项 一、花粉管萌发所需时间:从花粉落到柱头上至雌雄性核融合所经历的时间,因植物不同而异,较为普遍的是在10-48h之间。 栎属:12-14月;毛氏兜兰:19-20周;小叶杨:3-6d ;梨属:2-7d;苹果属:5d;番茄:50h;玉米:25-26h;小麦:1-4h;二棱大麦:30-35min。 二、环境因素对花粉管萌发影响很大 例如:小麦 10℃时,传粉后2h开始受精。 20℃时,萌发最好,30 min开始受精, 30℃时,萌发率比20℃低,花粉管生长快,只需15min就受精了。 当温度再升高时,大量花粉不萌发。 Ⅱ 种子生活力的快速测定 一、实验原理 有生活力的种子其胚细胞的原生质具有半透性,有选择吸收外界物质能力,某些染料如红墨水中的大红 G 不能进入细胞内,胚部不着色。而丧失生活力的种子其胚部细胞原生质膜丧失了选择吸收的能力,染料进入细胞内是胚部染色,所以可根据种子胚部是否染色来判断种子的生活力。 二、实验材料、试剂及用具 1.仪器设备:培养皿、刀片、烧杯、镊子。 2.试剂:5%红墨水 3.材料:小麦种子 三、实验步骤 1、浸种:将待测小麦种子在 30 ~ 35 ℃温水中浸种6 小时左右,以增强种胚的呼吸作用。 2、染色:取已吸胀的种子100粒,沿胚的中线切为两半,将一半置于培养皿中(不能仅取50粒),加入 5% 红墨水(以淹没种子为度),染色 10 ~ 15 min (温度高时间可短些)(时间不宜太长,为什么?)。 3、观察:染色后倒去红墨水,用水冲洗多次,至冲洗液无色为止。检查种子死活,凡种胚不着色或着色很浅的为活种子;凡种胚与胚乳着色程度相同的为死种子。可用沸水杀死的种子作对照观察。 4、计算有生活力种子的百分率。 活种子 死种子 四、注意事项 1、在切种子时,应垫在橡胶垫上,不可直接在桌面上切,以防切伤桌面; 2、染色时间不可过长,否则不易区别染色与否; 3、在使用切开的种子时,每粒种子每组只能使用其中的一半,但两组可以交换使用各自剩余的另一半。 花粉活力的测定教材 谢谢
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