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(2)纯化菌株时,通常使用的划线工具是__________。 划线的某个平板培养后,第一划线区域的划线上都不 间断地长满了菌落,第二划线区域所划的第一条线上 无菌落,其他划线上有菌落。造成划线无菌落可能的 失误操作有____________________________________ ______________________________________________。? (3)为探究苯磺隆的降解机制,将该菌种的培养液过 滤离心,取上清液做图乙所示实验。该实验的假设是 ____________________________________________,? 该实验设计是否合理?为什么?_________________ __________________________________________。? 【解析】(1)微生物生长繁殖需要的主要营养物质包括碳源、氮源、水和无机盐四类。要分离出有降解苯磺隆能力的土壤中的某些微生物,为了排除其他碳源的干扰,培养基中唯一碳源只能是苯磺隆。 (2)纯化菌株时,通常使用的划线工具是无菌接种环。据题意分析知,造成此现象的原因可能有两个:一是接种环灼烧后未冷却,菌种接触到高温的接种环而死亡;二是划第二划线区域的第一条线时未从第一区域末端开始。 (3)根据图乙所示实验中的上清液加入蛋白酶溶液推测,实验目的是探究目的菌株是否能分泌降解苯磺隆的蛋白质,实验设计不合理之处是缺少不加蛋白酶溶液、其他条件同图乙的空白对照。 答案:(1)氮源和无机盐 只有能利用苯磺隆的微生物能正常生长繁殖 (2)接种环 ①接种环灼烧后未冷却;②划线未从第一区域末端开始 (3)目的菌株能分泌降解苯磺隆的蛋白质 不合理,缺少空白对照 【加固训练】 1.(2018·福州模拟)高温淀粉酶在大规模工业生产中有很大的实用性。研究者从热泉嗜热菌样品中筛选了高效产生高温淀粉酶的嗜热菌,其筛选过程如下图所示: (1)进行①过程的目的是________,②过程所使用的 接种方法是________法。 (2)从用途上来说,Ⅰ号培养基属于________培养基, 配制时仅以________作为唯一碳源;从物理状态上 来说,Ⅱ号培养基属于固体培养基,配制时应加入 ________作为凝固剂。 (3)Ⅰ、Ⅱ号培养基配制和灭菌时,灭菌与调节pH的 先后顺序是________。 (4)培养一段时间后,应从Ⅰ号培养基上挑出________ 的菌落,接种到Ⅱ号培养基上。 【解析】(1)分析题图可知,①过程是梯度稀释;②过程是用稀释涂布平板法进行接种。 (2)本题实验的目的是筛选高效产生高温淀粉酶的嗜热菌,从用途上来说,Ⅰ号培养基属于选择培养基;本培养基以淀粉为唯一碳源;从物理状态上来说,Ⅱ号培养基属于固体培养基,配制时应加入琼脂作为凝固剂。 (3)培养基配制和灭菌时应先调节pH,然后再进行灭菌;如果先灭菌再调节pH,容易污染培养基。 (4)能分解淀粉的嗜热菌在Ⅰ号培养基上生长时可释放淀粉酶,分解培养基中的淀粉,在菌落周围形成透明圈,透明圈越大,淀粉酶的活性越强,所以要从中挑出透明圈大的菌落,接种到Ⅱ号培养基上。 (4)涂布平板:将样品涂布到_________________的 培养基上。 (5)挑选菌落:挑选产生_______的菌落。 鉴别纤维素分解菌 透明圈 【特别提醒】 关于纤维素分解菌的筛选的“三点”提醒 (1)纤维素分解菌的选择培养基中的碳源并不只有纤维素,其中酵母膏和水解酪素也可作为碳源。 (2)在纤维素分解菌的选择培养基上生长的也不只有纤维素分解菌。因此,选择培养后要进行鉴别培养,才能获得纤维素分解菌。 (3)出现透明圈的菌落也不一定就是纤维素分解菌。 【核心素养提升】 【典例示范】 (2016·全国卷Ⅲ)某同学用新鲜的泡菜滤液为实验材料分离纯化乳酸菌。分离纯化所用固体培养基中因含有碳酸钙而不透明,乳酸菌产生的乳酸能溶解培养基中的碳酸钙。回答下列问题: (1)分离纯化乳酸菌时,首先需要用________对泡菜滤 液进行梯度稀释,进行梯度稀释的理由是__________ ______________________。? (2)推测在分离纯化所用的培养基中加入碳酸钙的作用 有______________和________________。分离纯化时 应挑选出____________的菌落作为候选菌。? (3)乳酸菌在-20 ℃长期保存时,菌液中常需要加入一定量的________(填“蒸馏水”“甘油”或“碳酸钙”)。? 【素养解读】本题主要考查的核心素养是科学思维,具体表现在两个角度: 素养角度 具体表现 分析与综合 (1)分离纯化乳酸菌时要进行梯度稀释的原因分析; (2)中加入碳酸钙的作用分析 批判性思维 (3)菌种保藏方
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