经口毒性实验.docVIP

急性经口毒性试验 AcuteOralToxicityTest 1范围 本方法规定了动物急性经口毒性试验的基本原则、技术和要求。 本方法适用于评价化学品的急性毒性作用。 2规范性引用文件 OECDGuidelineforTestingofChemicals(No.401.Feb.1987) OECDGuidelineforTestingofChemicals(No.425.Feb.2001) USEPAOPPTISHealthEffectsGuideline(Series870.1100June1996) 3试验目的 3.1检测化学品对实验动物的急性毒性作用和强度。 3.2为亚急(慢)性等毒性试验提供剂量选择的依据。 3.3试验结果可作为化学品急性毒性分级和标签标识。 ４定义 4.1急性经口毒性(AcuteOralToxicity):一次或在24h内多次经口给予实验动物受试样品后，动物在短期内出现的健康损害效应。 4.2经口半数致死剂量（OralMedianLethalDose）:经口一次或24h内多次经口给予受试样品后，引起实验动物总体中半数死亡的毒物的统计学剂量。以单位体重接受受试样品的质量(mg/kgbw或g/kgbw)来表示。 4.3剂量-反应关系(Dose-responseRelationship)：表示化学毒物的剂量与某一群体中质效应的发生率之间的关系。 5试验基本原则 以经口灌胃法给予各试验组动物不同剂量的受试样品，每组用一个剂量，染毒剂量的选择可通过预试验确定。染毒后观察动物的毒性反应和死亡情况。试验期间死亡的动物要进行尸检，试验结束时仍存活的动物要处死并进行大体解剖。本方法主要适用于啮齿类动物的研究，但也可用于非啮齿类动物的研究。 6试验方法 6.1受试样品的处理 受试样品应溶解或悬浮于适宜的赋形剂中，（不溶性固体或颗粒状物质研磨、过100目筛）建议首选水或食用植物油（如玉米油）作溶剂，也可考虑使用其它赋形剂（如羧甲基纤维素、明胶、淀粉等）等配成混悬液；不能配制成混悬液时，可配制成其它形式(如糊状物等)，但不能采用具有明显毒性的有机化学溶剂。如采用有毒性的溶剂应单设溶剂对照组观察。 6.2实验动物 首选健康成年小鼠(18g～22g)和大鼠(180g～220g)，也可选用其它敏感动物。同性别实验动物个体间体重相差不得超过平均体重的20%。试验前动物要在试验环境中至少适应3～5d时间。 6.3剂量设计 根据所选方法的要求，原则上应设4～5个剂量组，每组动物一般为10只，雌雄各半。各剂量组间距大小以兼顾产生毒性大小和死亡为宜，通常以较大组距和较少量动物进行预试。如果受试样品毒性很低，也可采用最大限量法，即用20只动物（雌雄各半），采用5000mg/kgbw剂量，如未引起动物死亡，可不再进行多个剂量的急性经口毒性试验。 6.4试验步骤 6.4.1试验前实验动物应禁食（一般16h左右），不限制饮水。若采用代谢率高的其它动物，禁食时间可以适当缩短。 6.4.2正式试验时，称量动物体重，随机分组，然后对各组动物用经口灌胃法一次染毒。各剂量组的灌胃体积应相同,小鼠常用容量为20ml/kgbw，大鼠常用容量为10ml/kgbw。若一次给予容量太大，也可在24ｈ内分2～3次染毒（每次间隔4h～6h），但合并作为一次剂量计算。染毒后继续禁食3h～4h。若采用分批多次染毒，根据染毒间隔长短，必要时可给动物一定量的食物和水。 6.4.3观察期限及指标 观察并记录染毒过程和观察期内的动物的中毒和死亡情况。观察期限一般为14d，观察指标、LD50的计算及试验记录形式分别见附录1-A、1-B、1-D。 对死亡动物进行尸检。观察期结束后，处死存活动物并进行大体解剖，如有必要，进行病理组织学检查。 6.5可采用多种方法测定LD50，建议采用霍恩氏法、寇氏法、概率单位-对数图解法、最大耐受量试验和上-下法等(见附录1-B)。 7鉴定报告 鉴定报告应包括如下内容： 7.1受试样品名称、理化性状、配制方法、所用浓度； 7.2实验动物的种属、品系和来源（注明合格证号和动物级别）; 7.3实验动物饲养环境，包括饲料来源、室温、相对湿度、动物实验室合格证号； 7.4所用剂量和动物分组，每组所用动物性别、数量及体重范围； 7.5染毒后动物中毒表现和死亡情况及出现时间，大体解剖及病理所见； 7.6计算LD50的方法及其LD50和95%可信限； 7.7列表报告结果（建议的表格形式见附录D）； 7.8结论。 8试验结果的解释 通过急性经口毒性试验和LD50的测定可评价受试样品的急性经口毒性、急性经口毒性分级，其结果外推到人类的有效性很有限。 亚急性经口（14/28d）毒性试验 Sub-acuteOralToxicityTest 1范围 本规范规定了啮齿类动物亚急性