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PCR基因扩增实验室的要求
1.目的:规定在各区内所进行的工作及其操作。
2.适用范围:所有在本区内进行的工作。
3.负责人:谢秋华 操作人:谢秋华 胡锦辉 何小雪
4.程序:
实验室分四区:试剂贮存区、准备区;标本接收、制备区;扩增区、产物分析区。进入各区严格按照单一方向进行,即试剂贮存、准备区→标本接收、制备区→扩增区→产物分析区。各区及其设备、物品必须有明确的标记,严禁混用。
进入PCR实验室的工作人员(含卫生员),都必须遵守实验室的规则,尤其严格遵守进入PCR实验室的唯一流向。不可进入PCR扩增后区打扫卫生,再返回扩增前区工作。防止非本室工作人员串岗,进入本室。尤其不得为找人,而逆向误入PCR实验室。
总则
PCR实验室工作人员应具备医学检验、微生物检验基本知识,大专以上学历,并受过PCR实验的基础知识和技能培训。
PCR实验室分试剂准备,样本准备,PCR扩增和产物分析四个室,各室的实验物品(含加样器,试管架,吸头,记录纸,笔等),不得混用,须贴上标签予以区别。
实验室技术人员必须严格按照PCR实验室操作程序进行,包括实验室擦洗。台面消毒,离心管,吸头的无菌灭活准备,仪器使用和废弃物处理等。
进入实验室的工作人员必须更换各室不同的工作服(含帽和鞋),勤换洗工作服,以及遵守实验室的唯一流向的规定,严禁反向流动。
进入PCR实验室后区的物品不许带进PCR实验室前区。每天实验开始前,必须清洁地面和消毒实验室前区。实验结束应紫外线消毒实验台面,产物分析室紫外灯最好彻夜开启,排风扇应昼夜工作。每天下班前处理好废物,应关好水、电、煤气和门窗。
定期校准和维修PCR仪、酶标仪及离心机、水浴箱等仪器设备。
实验室内不得饮食、吸烟。
4.1标本接收区(标本的接收在检验科标本接收处进行)
4.1.1对送检的标本实行双签制度,并仔细检查是否符合检测要求,对有不符合要求的标本及时通知相关科室重新采样,并作记录,每份标本需给出唯一性编号。
4.1.2本区所有废弃物分类装入垃圾袋,封好,在垃圾筐上套好新的垃圾袋,将垃圾带出实验室。
4.2试剂贮存、准备区
4.2.1实验人员进入该区须穿本区工作服,须戴一次性手套。
4.2.2记录实验室干、湿度,记录冰箱温度。使用带有本区标识的记录本、纸和笔,每项记录,书写工整详细。
4.2.3准备好的试剂送入下一区 ,还原实验台面,将本区所有废弃物分类装入垃圾袋,封口,在垃圾筐上套好新的垃圾袋,将本区垃圾带出实验室。
4.2.4本区工作服留在本区缓冲间。
4.2.5本区维持相对正压状态(开启缓冲区的排气扇)。实验结束后,清洁实验台及地面打开紫外灯消毒大于120分钟。
4.3标本制备区
4.3.1实验人员进入该区须在缓冲区更换专用工作服及拖鞋。实验中须使用一次性帽子,戴手套,手套在实验过程中疑有污染应立即更换。
4.3.2将传入本区的试剂放入冰箱冷冻室试剂存放专区暂存。记录实验室干、湿度,记录冰箱温度。
4.3.3将冰箱内二周前的标本密封丢入垃圾筐,然后记录标本的保存情况。
4.3.4使用带有本区标识的记录本、纸和笔,每项记录,书写工整详细。
4.3.5按试剂盒说明书对标本进行处理,将处理好的标本在超净工作台内加样,记录标本的处理过程。
4.3.6将加样后的试剂传送下一区,还原实验台面,关闭所有仪器,记录仪器使用时间和运行状态。
4.3.7使用过的离心管、吸头须置于盛有2000mg/L有效氯消毒液的废液缸中,实验结束后方丢入垃圾袋,患者样品应按有生物传染性危险品对待。
4.3.8将本区所有废弃物分类装入垃圾袋,封口,在垃圾筐上套好新的垃圾袋,将垃圾带出本区。
4.3.9将工作服留在本区缓冲间。
4.3.10本区应避免不必要的走动,同时维持相对正压状态,实验结束后,清洁实验台及地面打开紫外灯消毒大于120分钟。
4.4扩增区
4.4.1实验人员进入该区须在缓冲区更换本区专用工作服及拖鞋。
4.4.2记录实验室干、湿度,记录冰箱温度。
4.4.3使用带有本区标识的记录本、纸和笔,每项记录,书写工整详细。
4.4.4将传入本区加样后的试剂上机扩增。
4.4.5扩增完成后,记录检测结果,及时发放报告单,记录仪器使用时间和运行状态。
4.4.6将本区所有废弃物分类装入垃圾袋,封口,在垃圾筐上套好新的垃圾袋,然后将垃圾带出实验室。
4.4.7将本区工作服留在本室再离开实验室
4.4.8严禁本区物品带至其他区,本区应避免不必要的走动,同时维持相对正压状态,实验结束后,清洁实验台及地面打开紫外灯消毒大于120分钟。。
4.5扩增产物分析区
4.5.1实验人员进入该区须在缓冲区更换本区专用工作服及拖鞋。
4.5.2记录实验室干、湿度。
4.5.3使用带有本区标识的记录本、纸和笔,每项记录,书写工整详细。
4.5.
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