原料奶新鲜度和掺杂异物检验方法美兰实验.doc

原料奶新鲜度和掺杂异物检验方法美兰实验 YLNB 1.2 1.原理 美兰还原试验是用来判断原料乳新鲜程度的一种色素还原试验。新鲜乳加入亚甲基兰后染为蓝色。如污染大量微生物产生还原酶使颜色逐渐变浅，直至无色，通过测定颜色变化时间，间接推断出鲜奶的卫生质量。 2.试剂 亚甲蓝水溶液：0.01g/300ml 3.器材 3.1 试管，20mm×200mm 3.2 水浴锅：可恒温到38℃ 4.方法 4.1 吸取10ml牛奶于灭菌试管中，在水浴中加热到38℃，再加入亚甲基兰溶液1ml，混匀。 4.2 将试管放入水浴中，每30min观察一次褪色情况，并记录每个样品褪色时间。 5.结果判定 通常，通过溶液的褪色时间可以估算出牛奶中细菌总数。（应为开始退色的时间计）。 6.影响因素 6.1细菌的活性：由于原奶在实验前冷藏时间的延长，传统的适温菌型（产酸菌的牛奶菌丝），逐渐转换为嗜冷菌型（分解蛋白质和脂肪的菌丝），脱色时间和细菌总数之间的相关性变弱。 6.2溶液的退色时间与染色液的浓度有关。 6.3此方法对体细胞（白细胞）及其他细胞的还原作用也敏感，因此还可检验异常乳（乳房炎及初乳或末乳）。 裉色时间相当每ml牛乳中的细菌总数 20min ＞2×107 20-40min 1.0×107-2.0×107 40min-1小时 5.0×106-1.0×107 1小时-2小时 4.0×106-5.0×106 2小时-3小时 3.0×106-4.0×106 3小时-4小时 2.0×106-3.0×106 4小时-5小时 1.0×106-2.0×106 5小时-5.5小时 5.0×105-1.0×106 5.5小时-6.5小时 3.0×105-5.0×105 6.5小时-7.5小时 1.0×105-3.0×105 ＞7.5小时 〈1.0×105 注：此方法较适用于原料奶的验收检验，所以一般时间控制在40分钟之内观察为宜。