槐定碱对大鼠慢性心力衰竭干预作用的分析.pdfVIP

目 录 摘要……………………………………………………………………．．1． ABSTRACT…………………………………………………………………………………．．一4． 缩略词表…………………………………………………………………．．7． 前言……………………………………………………………………………………………．99．日U 舌……………………………………………………………………………………………一 一 第一部分槐定碱对慢性心力衰竭大鼠心肌细胞异常钙循环的影u向一13． 一、HIJ舌……………………………………………………………………………………．-13一 一、前言………………………………………………………………一13． 二、材料与方法………………………………………………………．．．14． 三、结果………………………………………………………………．．．22． 四、讨论………………………………………………………………．．39． 第二部分槐定碱对慢性心力衰竭大鼠心肌超微结构的影响………．．．43一 一 一、日U舌……………………………………………………………………………………．一一、前言…………………………………………………………………一4—3． 二、材料与方法………………………………………………………．．．43． 三、 结果………………………………………………………………一47． 四、讨论………………………………………………………………．．50． 总结与展望……………………………………………………………．．．52． 参考文献………………………………………………………………．一53． 在读期间发表论文和参加科研工作情况说明…………………………．59． 致谢…………………………………………………………………………………………．．60． 综述…………………………………………………………………………………………．．61． 槐定碱对大鼠慢性心力衰竭干预作用的研究 摘要 目的： 的单体生物碱，近年来发现槐定碱在抗心律失常和增强心肌收缩力方面有重要的药理 作用和应用前景，本实验以慢性心衰大鼠作为模型，以槐定碱作为干预剂，从细胞、 分子和超微结构水平，对慢性心衰大鼠心肌细胞异常钙循环和超微结构进行研究，为 槐定碱的临床应用提供基础性实验资料。 方法： (1)实验分组：将SD大鼠随机分为5组，每组lO只，分别为假手术组，心力 (2)心衰模型制备：心力 衰竭组，槐定碱低、中、高(5、10、20mg／kg)剂量组； 衰竭组和药物干预组大鼠均行冠状动脉左前降支永久性结扎，假手术组除只穿线不结 扎冠脉外，其余步骤相同。4周后检测各组大鼠心哀模型相关指标； (3)心肌细胞 L．型钙电流(Ic。．L)、胞浆内钙瞬变和肌浆网内钙容量的测定：酶解法分离心肌细胞． Fluo．3／AM负载心肌细胞，采用全细胞膜片钳．激光扫描共聚焦显微镜联机技术同步 记录各组大鼠心肌细胞Ic番L和胞浆内钙瞬变；利用Fluo．5N／AM负载心肌细胞，直接 记录肌浆网内钙容量； 析； (5)超微结构观察：各组大鼠心肌按照常规透射电镜样品制备技术制样后，透 射电镜下观察，拍照记录超微结构。(6)统计学处理：采用SPSSI1．0统计软件包进 行分析。全部计量资料数值均以均数±标准差(孑±J)表示。各组之间差异显著性 判别先进行方差分析(ANOVA)，如差异显著，则进一步用LSD法进行两两比较。 P0．05认为差异有统计学意义。 结果： (1)槐定碱对慢性心衰大鼠心重指数及心功能的影响：与假手术组相比，心力 明显(P0．05)。(2)槐定碱对心肌细胞L．型钙电流(Ic。．L)的影响：心力衰竭组 ca．L较心 大鼠的Ic。．L低于假手术组；槐定碱低剂量组、中剂量和高剂量组心肌细胞的I 力衰竭组均明显增大。(3)槐定碱对各组大鼠心肌细胞钙诱导钙释放(CICR)的影 钙调控相关蛋白分子生物学结果显示：①与假手术组相比，心衰组S