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淀粉酶活性的测定 一、实验目的 掌握测定淀粉酶活性的原理 熟悉测定淀粉酶活性操作方法 方法一：3，5-二硝基水杨酸测淀粉酶活性 一、实验目的 1. 掌握用3，5-二硝基水杨酸测淀粉酶活性的方法 2. 熟悉3，5-二硝基水杨酸测淀粉酶活性的原理 二、基本原理 1、测量依据 淀粉酶催化淀粉分子中α-1,4糖苷键水解,产生还原糖淀粉酶活力的大小与产生的还原糖的量成正比，可以单位体积样品在一定时间内生成的还原糖的量表示酶活力。 2、相关反应: ：淀粉酶产生的这些还原糖能使3，5－二硝基水杨酸还原，生成棕红色的3－氨基－5－硝基水杨酸。具体反应式为： 三、操作步骤 实验设备 试管，滴管，容量瓶，分光光度计，酸度计，电热恒温水浴锅，电磁炉。 1. 实验设备： 三、操作步骤 （1）0.1mol/l pH5.6的柠檬酸缓冲液：A液：称取柠檬酸20.01g，定容至1000ml；B液：称取柠檬酸钠29.41g，定容至1000ml；取A液55ml与B液145ml混匀。 （2）1%可溶性淀粉溶液：1g淀粉溶于100ml 0.1mol/l pH5.6的柠檬酸缓冲液； 实验试剂及其配制： （3）1%3,5-二硝基水杨酸试剂：称取3,5-二硝基水杨酸1g、NaOH 1.6g、酒石酸钾钠30g，定容至100ml水中，紧盖瓶塞，勿使CO2进入； 麦芽糖标准溶液：取麦芽糖0.1g溶于