第二章 样品预理方法.pptVIP

样品预处理的目的 除去微粒 减少干扰杂质 浓缩微量的组份 提高检测的灵敏度及选择性 改善分离的效果 有利于色谱柱及仪器的保护 2、样品处理的必要性和重要性 色谱分析的全过程包括：样品采集、样品制备、色谱分析、数据处理与结果表述 样品种类繁多，其组成、浓度、物理形态等均是色谱分析测定的影响因素。样品处理技术就成为提高分析测定效率、改善和优化色谱分析的重要环节。 占样品分析时间的比例（ 60%） 样品预处理所用时间远大于色谱分离的时间 占分析的消耗总成本最大 消耗大量的溶剂及其他化学品 实验的重复性及准确性最差的环节 影响实验结果好坏的最重要因素 3、样品处理的原则 （1）样品中可能存在的物质组成？浓度水平？ （2）样品中的主要组分？ （3）采样方法是非破坏性的还是破坏性的？ （4）收集的样品必须有代表性。 （5）采用方法必须和分析目的保持一致。 （6）样品制备过程中尽可能防止和避免待测定组分发生化学变化或丢失 3、样品处理的原则（续） （7）样品处理中，若进行待测定组分的化学反应，则反应应是已知的和定量完成的。 （8）样品制备过程中，要防止和避免待测定组分受到污染，减少无关化合物引入制备过程。 （9）处理过程应简单易行，所用样品处理装置的尺寸应与处理样品的量相适应。 （10）采用后应尽可能快的进行分析样品的制备和分析，或使用适当的方法消除可能产生的干扰，做好样品的保存。 二、样品的采集 气体（包括蒸汽） 涉及的样品形式 液体（包括乳液） 固体（包括气体悬浮物、 液体悬浮物） 直接采集 主要采集方法 富集采集 化学反应法采集 直接采集：只需将样品直接引进容器中，所用容器最好是新的或洗净后干燥的，以防止其他样品的残留影响。 富集采集：是在采集过程中，同时将待测组分富集，如吸附采样中选择合适的吸附材料，在吸附的同时使待测材料在吸附材料上富集 使用采集方法的注意事项 （1）采集的样品应具有代表性，要注意采样的时间、地点及采样位置的选择。 （2）所有样品都要采集双份，一份分析样品，一份保存样品，备复查时使用。 （3）样品的采集和储存过程要作记录，详列采样时间、地点、准确位置等。 （4）采集储存中待测组分不应有损失或发生化学变化。 损失—包括挥发、在储存容器上的吸附等物理原因 化学变化——包括被氧化、微生物引起的分解、各组分间的化学反应等 （5）避免样品受到外界污染。 （6）采集后要尽快进行分析样品的制备和分析。 三、样品预处理常用的方法 高速离心 过滤、超滤 选择性沉淀 萃取 索氏抽提 衍生反应 新样品处理技术—加速溶剂萃取（ASE） 浓缩样品 液-固萃取 / 液-液萃取 固相萃取样品小柱 样品预处理的过程 去除微粒 过滤 过滤膜/过滤装置 有机(0.5m)/无机(0.45m) 膜片可更换 一次性使用的膜 使用方便简单，交叉污染小 有更小内径，可用于微量样品的处理 高速离心 大于：10,000g 超 滤 机理 超滤是一种基于分子量分离的技术 目的 根据分子量的不同把分子、细胞及病毒等分为不同的馏份 除去小分子样品中的大分子蛋白 脱盐 选择性沉淀 常用于生化样品中除蛋白 有机溶剂 乙腈，甲醇 强酸 三氯乙酸，过氯酸 盐 50% 硫酸铵 10% TCA 样品衍生 提高检测的灵敏度 增加紫外基团以增强紫外检测的灵敏度 增加荧光基团使样品用高灵敏度荧光检测器 改变分离的选择性 改变组份的基团，如： 变离子型化合物为非离子型，用反相方法分离 典型的例子 氨基酸分析 加速溶剂萃取（ASE） ASE 是用溶剂对固体、半固体的样品进行萃取的技术. ASE 的原理是选择合适的溶剂、通过增加温度和压力来提高萃取过程的效率. ASE 可用来替代索氏提取、超声萃取、手工振摇、煮沸法和其他萃取方法 三种不同型号的ASE ASE的突出优点 快速，15分钟 溶剂用量少 萃取效率高 样品基体影响小 可同时选用四种溶剂萃取 安全，全自动 ASE建立了环境, 药物, 聚合物, 食品, 和化妆品工业的大量应用 ASE工作流程 食品安全评价中ASE的应用 水果和蔬菜中的农药 动物组织中的二噁英和多氯联苯 粮食中的农药 粮食中的毒枝菌素 熏肉中的多环芳烃 葡萄干中的杀真菌剂 咸肉中的硝酸盐/亚硝酸盐 一些正在发展的方法 ASE?的应用领域 浓缩样品 浓缩样品的方法 萃取/吹干 沉淀/再溶解 色谱法 液固抽提/固相萃取小柱 固相萃取（SPE）技术 固相萃取技术是基