生物化学逆转录.pptxVIP

生物化学课件逆转录一、逆转录病毒的基因组RNA以逆转录机制复制逆转录(reverse transcription)逆转录酶(reverse transcriptase) 逆转录酶RNADNARNA 模板逆转录酶DNA-RNA杂化双链RNA酶单链DNA逆转录酶双链DNA逆转录病毒细胞内的逆转录现象:RNA病毒在细胞内复制成双链DNA的前病毒(provirus)。前病毒保留了RNA病毒全部遗传信息，并可在细胞内独立繁殖。在某些情况下，前病毒基因组通过基因重组(recombination)，参加到细胞基因组内，并随宿主基因一起复制和表达。这种重组方式称为整合(integration)。前病毒独立繁殖或整合，都可成为致病的原因 逆转录酶催化的cDNA合成 AAAA逆转录酶 A AA A T T T T碱水解 T T T T DNA聚合酶ⅠSI核酸酶试管内合成cDNA:cDNA ?complementary DNA? 以mRNA为模板，经逆转录合成的与mRNA碱基序列互补的DNA链 分子生物学研究可应用逆转录酶，作为获取基因工程目的基因的重要方法之一，此法称为cDNA法 二、逆转录的发现发展了中心法则逆转录酶和逆转录现象，是分子生物学研究中的重大发现 逆转录现象说明：至少在某些生物，RNA同样兼有遗传信息传代与表达功能对逆转录病毒的研究，拓宽了20世纪初已注意到的病毒致癌理论 1、DNA复制的基本特点2、原核生物的复制过程包括起始、延长和终止（1）起始是将DNA双链解开形成复制叉（2）复制的延长由引物或延长中的子链提供3′-OH，供dNTP掺入生成磷酸二酯键，延长中的子链有前导链和后随链之分，复制产生的不连续片段称为冈崎片段（3）复制的终止需要去除RNA引物、填补留下的空隙并连接片段之间的缺口使成为连续的子链3、真核生物复制发生于细胞周期的S期，其过程与原核生物相似，但更为复杂和精致。复制的延长和核小体组蛋白的分离和重新组装有关。复制的终止需要端粒酶延伸端粒DNA4、非染色体基因组采用特殊的方式进行复制DNA复制本章知识点框架图：原核生物复制真核生物复制起始：DNA的解链；引物合成和引发体形成延长：复制的延长指在DNA-pol催化下，dNTP以dNMP的方式逐个加入引物或延长中的子链上，其化学本质是磷酸二酯键的不断生成 终止：双向复制的复制片段在终止点处汇合起始：与原核生物基本相似延长：DNA聚合酶转换；核小体组蛋白的分离和重新组装终止：需要端粒酶延伸端粒DNA