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尿葡萄糖定性实验干化学法作业指导书
1. 实验原理
尿液中葡萄糖使尿液单联或多联试带上的特殊试带模块颜色发生变化,呈色深浅与尿液中葡萄糖浓度成正比。
2. 标本采集
2.1 标本采集前病人准备:以清晨第一次尿为宜,急诊患者可随时留取。
2.2 标本种类:新鲜尿液
2.3 标本要求:采集患者尿液标本时,盛尿液的容器必须清洁干燥,要求留取中段尿。
3. 标本储存:从排出到检测应在2小时内完成。如不能及时送检或分析,应置4℃下冷藏保存,但冷藏时间不得超过6小时。
4. 标本运输:室温运输。
5. 标本拒收标准:细菌,经血,白带,精液,粪便污染标本不能作测定。
6. 试剂
6.1 试剂名称 Combur10 TestR M
6.2 试剂厂家 德国 Roche 诊断试剂公司
6.3 包装规格:100Test/kit
6.4 试剂盒组成:试纸条:100条
6.5 试剂储存条件及有效期:试剂盒贮存于2-30℃条件下,可使用至试剂盒所标示有效期。
7. 仪器设备
7.1 仪器名称:罗氏尿液分析仪
7.2 仪器厂家:Roche
7.3 仪器型号:MiditronR Junior II
7.4 仪器校准程序:在使用过程中,一般是两周校准一次,如超过此期限,仪器会提示“Please Calibrate”(请校准)。通过测定内部参比块,环境温度和光学系统的改变都可被补偿。当条件改变很大时,比如参比块腐蚀或发光二极管的亮度变暗,仪器将打印出一个错误信息;校准条是有稳定特征的灰白色试条,这些校准条只能使用一次。校准前,应先清洁试纸托盘与运输臂。步骤为:在“READY—START”显示时,按Calibrate键,放上校准条。再按Calibrate键,校准条被送入机器内,屏幕显示“Calibrating”(正在校准),约一分钟后,标准结果将被打印出。“Calibrating O.K”,表示校准成功。
8. 操作步骤:
8.1 按START键,显示“Prepare Strip”,此时试条筒中拿出试条。
8.2 约4秒钟后,显示“Dip Strip 1”,同时绿灯闪烁,将试条浸入尿样中。
8.3 当显示“Insert Strip 1”,把试条放在试条托盘上,此时绿灯亮,若要人工输入颜色,按Color键,再按Set键,选择相近的颜色,最后按Enter键确认,同样也可人工输入浊度。
8.4 约20秒后,显示“Dip Strip 2”,然后重复以上过程。
8.5 每一个测量完成后将自动打印出结果。
9. 结果判断:不变色(-),浅灰色(+),灰色(++),灰蓝色(+++),紫蓝色(++++)
10. 质量控制:阳性质控液的使用,低浓度质控液(葡萄糖3g/L)定性为(+),高浓度质控液(15g/L)定性为(+++)。
11. 参考范围:阴性
12. 临床意义:尿糖阳性见于:糖尿病,肾性糖尿病,甲状腺机能亢进等。内服或注射大量葡萄糖及精神激动等也可致阳性反应。
13. 操作性能:快速简便,特异性强,灵敏度高,具有半定量作用。
14. 方法局限性
14.1 试带应避光干燥保存。
14.2 灵敏度受尿比密及温度的影响,浓缩尿灵敏度低,温度高时灵敏度高。
14.3 本法也受VitC等还原性物质的影响,处理方法同班氏法。
15. 注意事项
15.1 容器要清洁,不含氧化性物质,最好使用一次性尿杯。
15.2 如气温较高,标本不宜长时间存放,以免细菌繁殖消耗尿中葡萄糖,造成假阴性结果。
15.3 VitC对测定有影响,注射大剂量VitC后5天内不做尿糖定性。如确实需要测定,先将尿液煮沸几分钟后再进行测定。
15.4 注意高比密尿或高酮体尿对试带法的影响。必要时可用班氏法辅助确定阳性程度。
15.5 尿糖定性实验只是作为糖尿病的筛检试验,如需确诊或进行动态观察,必须结合血糖定量检查。
16. 当检验系统(仪器)不能工作时,所采取的补救措施:当检验系统(仪器)不能工作时,可联系仪器厂家,进行紧急修理,如一时不能修好,如别的实验室有同类仪器可到别的仪器上先测,如别的实验室无同类仪器,申请厂家送一台能正常工作的仪器代替。
17. 参考文献
17.1 叶应妩 王毓三 主编.全国临床检验操作规程.中华人民共和国卫生部医政司,1997,北京:125-126
17.2 刘成玉 主编.临床检验基础实验指导.人民卫生出版社,2002,北京:103-104
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