氮测定标准操作规程.doc

氮测定标准操作规程 1 简述 1.1 氮测定法（中国药典2005年版二部附录Ⅶ D）使用于含氮有机物的含氮量测定。 1.2 本法系将供试品在硫酸及催化剂作用下，经强热分解使有机氮转化为硫酸铵，再经强碱碱化使氨馏出并吸收于硼酸液，最后用硫酸滴定液滴定，求出氮含量。简述为消化、蒸馏及滴定三步。 1.3 氮测定法分第一法与第二法，应按中国药典该品种项下的规定选用。 2 仪器与试药 2.1 仪器 2.1.1 常量定氮仪由500ml凯氏烧瓶、氮气球和冷凝管组成。 2.1.2 半微量定氮仪由1000ml圆底烧瓶、连有氮气球的蒸馏器和直形冷凝管等组成。 2.1.3 分析天平 感量为0.1mg的天平，适用于精密称取0.1g以上者；感量为0.01mg的天平，适用于精密称量0.1g以下者。 2.1.4 消化与蒸馏可用电炉或煤气加热。 2.1.5 蒸馏连接用的乳胶管或橡胶管，应用氢氧化钠试液煮20分钟，洗去碱液后用水煮沸，洗净，晾干。 2.2 试药 2.2.1 试剂均为化学纯。 2.2.2 滴定液的配制和标定应符合中国药典附录规定。硫酸滴定液（0.005mol/L）用硫酸滴定液（0.05mol/L）定量稀释制成。 2.2.3试液、指示液的配制均+应符合中国药典附录规定。 2.2.4 硫酸铜用作消化催化剂；硫酸钾用以提高硫酸的沸点，也可将硫酸钾与硫酸铜按10:1比例混合研匀使用。 3 操作方法 3.1 第一法（常量法） 3.1.1 称样 取供试品适量（约相当于含氮量25～30mg），精密称定，置干燥的500ml凯氏烧瓶中。供试品如为固体或半固体，可用定量滤纸包裹加入，也可直接称入。 3.1.2 消化 在凯氏烧瓶中依次加入硫酸钾（或无水硫酸钠）10g和硫酸铜0.5g，再沿瓶壁缓缓加入硫酸20ml；若瓶颈上有少量供试品黏附，可用硫酸冲下，加玻璃珠或沸石2～3粒，在瓶口置一小漏斗并使烧瓶成45℃斜置，用直火（加热部位保持在液面之下）缓缓加热，使溶液的温度保持在沸点以下，等泡沸停止，消化液由黑色渐变棕色时，强热至沸，俟溶液成澄清的绿色时，继续加热30分钟，放冷，沿瓶壁缓缓加水250ml，摇匀，放冷。 3.1.3 蒸馏 沿瓶壁加40%氢氧化钠溶液75ml，使流至瓶底自成一液层，加锌粒数粒，用氮气球将凯氏烧瓶与冷凝管连接（氮气球可防止碱液溅入硼酸吸收液）。另取2%硼酸溶液50ml，置500ml锥形瓶中，加甲基红-溴甲酚绿指示液10滴，将冷凝管尖端浸入硼酸溶液的液面下；轻轻摇动凯氏烧瓶，摇匀（防止温度骤然变化引起硼酸接受液倒吸），加热蒸馏，蒸至接受液的总体积约为250ml时，将冷凝管尖端提出液面，使蒸汽冲洗约1分钟，用水淋洗尖端，停止蒸馏。 3.1.4 滴定 馏出液用硫酸滴定液（0.05mol/L）滴定至溶液由蓝绿色变为灰紫色，并将滴定结果用空白试验校正，即得。每1ml的硫酸滴定液（0.05mol/L）相当于1.401mg的N。 3.2 第二法（半微量法） 3.2.1 称样 取供试品适量（约相当于含氮量1.0～2.0mg），精密称定，置干燥的30～50ml凯氏烧瓶中。 3.2.2 消化 在烧瓶中加硫酸钾（或无水硫酸钠）0.3g与30%硫酸铜溶液5滴，再沿瓶壁用吸管滴加硫酸2.0ml，并加玻璃珠1～2粒，在凯氏烧瓶口放一小漏斗，并使烧瓶成45°斜置，用小火缓缓加热使消化页保持在沸点以下，并使小火保持在液面下，等泡沸停止，溶液由黑色变为棕黄色时，逐步加大火力强热至沸，俟溶液成成名绿色后，除另有规定外，继续加热10分钟，放冷，加水2ml，放冷。 3.2.3 蒸馏 按中国药典附录附图连接蒸馏装置，A 瓶中加水适量与甲基红指示液数滴，加稀硫酸使成酸性，加玻璃珠或沸石数粒。将连有氮气球的蒸馏器和直形冷凝管用水加热蒸气淋洗，并使水自冷凝管尖端反冲洗涤2～3次，从加样品口淋洗1次，洗涤液排出蒸馏管。取2%硼酸溶液10ml，置100ml锥形瓶中，加甲基红-溴甲酚绿混合指示液5滴，将冷凝管尖端浸入液面下；将凯氏烧瓶中已消化的内容物经漏斗移入连有氮气球的蒸馏器中，用水少量淋洗凯氏烧瓶及漏斗2～3次，每次约3～5ml，再加入40%氢氧化钠溶液10ml，用水少量洗涤漏斗1次，关闭漏斗（加少量水封闭出口），进行蒸馏（蒸馏时不宜泡沸过高，以免溅至氮气球），至硼酸液由酒红色变为蓝绿色起，继续蒸馏约10分钟，将100ml锥形瓶下移至冷凝管尖端提出液面，使蒸气继续冲洗约1分钟，用水淋洗尖端后停止蒸馏。 3.2.4 滴定 馏出液用硫酸滴定液（0.005mol/L）滴定至溶液由蓝绿色变为灰紫色，并将滴定结果用空白试验（空白馏出液的容积应与供试品所得馏出液的容积基本相等）校正。每1ml的硫酸滴定液（0.005mol/L）相当于1.401mg的N。 3.2.5 空白试验 照供试品消化、蒸