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依赖Rho (ρ)因子的转录终止 非依赖Rho因子的转录终止 帽子结构 ? RNA编辑作用说明,基因的编码序列经过转录后加工,是可有多用途分化的,因此也称为分化加工(differential RNA processing)。 2. 非依赖 Rho因子的转录终止 DNA模板上靠近终止处,有些特殊的碱基序列,转录出RNA后,RNA产物形成特殊的结构来终止转录。 5`UUGCAGCCUGACAAAUCAGGCUGAUGGCUGGUGACUUUUUAGUCACCAGCCUUUUU... 3` 5`UUGCAGCCUGACAAAUCAGGCUGAUGGCUGGUGACUUUUUAGUCACCAGCCUUUUU... 3` RNA 5?TTGCAGCCTGACAAATCAGGCTGATGGCTGGTGACTTTTTAGTCACCAGCCTTTTT... 3? DNA UUUU...… UUUU...… 5`UUGCAGCCUGACAAAUCAGGCUGAUGGCUGGUGACUUUUUAGUCACCAGCCUUUUU... 3` 茎环(stem-loop)/发夹(hairpin)结构 茎环结构使转录终止的机理 使RNA聚合酶变构,转录停顿; 使转录复合物趋于解离,RNA产物释放。 5′pppG 5? 3? 3?5? RNA-pol 小 结 二、转录过程 1、起始:RNA聚合酶的σ因子(原核) 启动子:RNA聚合酶识别、结合、起始转录的特异DNA序列,如TATA盒 真核生物为单顺反子,原核生物为多顺反子转录 2、链延长:核心酶 链延长方向:5’端→3’端 3、终止:ρ因子 终止信号(终止子):回文结构的GC富集区+AT富集区 第三节 真核生物的转录后修饰 Post-transcriptional Modification 几种主要的修饰方式 1. 剪接(splicing) 2. 剪切(cleavage) 3. 修饰(modification) 4. 添加(addition) 一、真核生物mRNA的转录后加工 1、首尾的修饰 5?端形成 帽子结构(m7GpppGp —) 3?端加上多聚腺苷酸尾巴(poly A tail) 5? pppGp… 5? GpppGp… pppG ppi 鸟苷酸转移酶 5? m7GpppGp… 甲基转移酶 SAM 帽子结构的生成 5? ppGp… 磷酸酶 Pi 2、mRNA的剪接 (1)hnRNA和snRNA 核内的初级mRNA称为杂化核RNA (hetero-nuclear RNA, hnRNA) snRNA (small nuclear RNA) 核内的蛋白质 小分子核糖核酸蛋白体 (并接体, splicesome) snRNA 真核生物结构基因,由若干个编码区和非编码区互相间隔开但又连续镶嵌而成,去除非编码区再连接后,可翻译出由连续氨基酸组成的完整蛋白质,这些基因称为断裂基因。 断裂基因(splite gene) C A B D 编码区 A、B、C、D 非编码区 (2)外显子(exon)和内含子(intron) 外显子 在断裂基因及其初级转录产物上出现,并表达为成熟RNA的核酸序列。 内含子 隔断基因的线性表达而在剪接过程中被除去的核酸序列。 鸡卵清蛋白基因 hnRNA 首、尾修饰 hnRNA剪接 成熟的mRNA 鸡卵清蛋白基因及其转录、转录后修饰 鸡卵清蛋白成熟mRNA与DNA杂交电镜图 DNA mRNA (3)mRNA的剪接 —— 除去hnRNA中的内含子,将外显子连接。 snRNP与hnRNA结合成为并接体 ① ② ③ UACUACA - AG UG U4 U5 U6 E1 E2 U1 U2 UACUACA - AG UG U6 E1 E2 U1、U4、U5 (4)mRNA的编辑(mRNA editing) 人类apo B基因 mRNA(14500个核苷酸) 肝脏 apo B100 (分子量为500 000) 肠道细胞 apo B48 (分子量为240 000) mRNA编辑 刘新文,RNA生物合成 * * * 刘新文,RNA生物合成 * RNA的生物合成 RNA Biosynthesis 第十三章 转录 (transcription) :生物体以DNA为模板合成RNA的过程 。 转录 RNA DNA RNA的生物合成:转录、RNA复制 复制和转录的区别 第一节 RNA转录体系 参与转录的物质 原料: NTP (ATP, UTP, GTP, CTP) 模板: DNA 酶: RNA聚合酶(RNA polymerase, RNA-pol) 其他蛋白质因子 一、转录模板 DNA分子上转录出RNA的区段,称为结构基因(struc
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