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能发荧光的热带斑马鱼 ? 能发光的水母 设想一 能否培养出具有抗虫 性状的抗虫棉呢? 胰岛素是治疗糖尿病的特效药,长期以来只能从猪、牛等动物的胰腺中提取,产量低成本高。 而微生物生长迅速,容易控制。 设想二 能否让微生物产生出人的 胰岛素等珍贵药物? 这些定向改造基因 的设想能实现吗? 定向改造生物的技术 ——基因工程 又称基因拼接技术,或重组DNA 技术。 通俗的说,就是按照人们的意愿,把一种生物的某种基因提取出来,加以修饰改造,然后放到另一种生物的细胞里,定向的改造生物的遗传性状。 ? 基因工程概念 培育转基因抗虫棉的简要过程: 你认为上述培育转基因抗虫棉的关键步骤有哪些? 普通棉花(无抗虫特性) 苏云金芽孢杆菌 提取 抗虫基因 导入 棉花细胞(含抗虫基因) 抗虫棉花(有抗虫特性) 与运载体DNA拼接 基因的剪刀——限制性内切酶(简称限制酶) (一)基因操作的工具 限制酶是在生物体(主要是微生物)内的一种酶,能将外来的DNA切断,由于这种切割作用是在DNA分子内部进行的,故名限制性内切酶。 特点:特异性。 即一种限制酶只能识别一种特定的核苷酸序列,并且能在特定的切点上切割DNA分子。 基因的剪刀——限制性内切酶(简称限制酶) 大肠杆菌(E.coli)的一种限制酶能识别GAATTC序列,并在G和A之间切开。 限制酶 限制性内切酶作用过程 点击播放 CTTCATG AATTCCCTAA GAAGTACTTAA GGGATT GGCATCTTAA AATTCCGTAG 练习使用EcoRI 剪切目的基因 CTTCATG AATTCCCTAA GAAGTACTTAA GGGATT GGCATCTTAA AATTCCGTAG 目的基因 黏性末端 什么是黏性末端? 被限制酶切开的DNA两条单链的切口 带有几个伸出的核苷酸, 它们之间正好互补配对, 这样的切口叫黏性末端。 被同一种限制酶切断的几个DNA是否具有相同的黏性末端? 思考: 是 2.基因的针线—DNA连接酶 DNA连接酶连接的是两个脱氧核苷酸分子的什么部位? 基因操作的工具 磷酸二酯键 磷酸二酯键 DNA连接酶的作用过程 点击播放 基因的针线:DNA连接酶 G A A T T C C T T A A G G A A T T C C T T A A G G C T T A A A A T T C G G C T T A A A A T T C G G C T T A A A A T T C G 用同种限制酶切割 外源基因(如抗虫基因)怎样才能导入受体细胞(如棉花细胞)? 导入过程需要运输工具——运载体。 运载体的作用有哪些? 作用一:转移外源基因 作用二:大量复制外源基因。 3.基因的运输工具——运载体 基因操作的工具 常用的运载体有两类: 1)质粒(最常用) (小型环状DNA) 2)噬菌体 或某些动植物病毒 基因工程的“四步曲” 提取目的基因 1 目的基因与运载体结合 2 将目的基因导入受体细胞 3 目的基因的检测和鉴定 4 目的基因 (三)基因操作的基本步骤 目的基因是人们所需要转移或改造的基因。 (三)基因操作的基本步骤 步骤二:目的基因与运载体重组 1) 2) 3) (三)基因操作的基本步骤 常用的受体细胞: 将目的基因导入受体细胞的原理 步骤三:目的基因导入受体细胞 (三)基因操作的基本步骤 步骤四:目的基因的检测和鉴定 不能,受体细胞必须表现出特定的性状,才能说明目的基因完成了表达。 (三)基因操作的基本步骤 受体细胞摄入DNA分子后就说明目的基因完成了表达吗? 1 2 基因工程的操作工具 1.基因的剪刀 ——限制酶 2.基因的针线 ——DNA连接酶 3.基因的运输工具 ——运载体 基因工程的操作步骤 1.目的基因的提取 2.目的基因与运载体结合 3.目的基因导入受体细胞 4.目的基因的检测与鉴定 基因工程的原理 基因重组 基因
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