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* 原位光刻合成 美国著名的Affymetrix公司率先开发的寡聚核苷酸原位光刻专利技术,是生产高密度寡核苷酸基因芯片的核心关键技术。 * 原位光刻合成原理 Light directed oligonucleotide synthesis. A solid support is derivatized with a covalent linker molecule terminated with a photolabile protecting group. Light is directed through a mask to deprotect and activate selected sites, and protected nucleotides couple to the activated sites. The process is repeated, activating different sets of sites and coupling different bases allowing arbitrary DNA probes to be constructed at each site. * 预先合成后点样(off-chip synthesis) 接触式点样 非接触式点样 * 基因芯片点样的方式 接触式点样适合于DNA芯片的制作 即点样针直接与固相支持物表面接触,将DNA样品留在固相支持物上 * 接触式点样 Best! * ArrayIt ChipMaker Pins 带有细槽的不锈钢针尖 载样能力: 200 to 600 nL 点样体积: 250 pL to 2.5 nL (pin size) 点样直径: 100 μm to 500 μm (pin size) Dipping of pin for sample pickup Touching of slide with pin to leave spot Control print volume with pin size * Stealth and Chipmaker Pin (TeleChem) * Chipmaker 点样技术 * Stealth Pins * Catalog Number Spot Diameter (μm) Uptake volume (μl) Delivery Volume (nl) Minimum spot spacing (μm ) Maximum subgrid per pin (spots) Density (spots /cm2) Maximum number Of spots (18mm×72mm) SMP3 90-100 0.25 0.6 120 36*36 6,350 82,944 SMP4 120-130 0.25 1.0 160 28*28 3,842 50,176 SMP5 150-160 0.25 1.3 200 22*22 2,372 30,967 SMP6 180-190 0.25 1.5 240 18*18 1,588 20,736 SMP7 200-220 0.27 1.7 260 16*16 1,254 16,384 SMP8 210-230 0.28 1.8 275 16*16 1,254 16,384 SMP9 260-290 0.28 2.0 340 12*12 706 9,216 SMP10 300-330 0.29 2.3 400 10*10 490 6,400 * TeleChem公司点样针技术 不断发展的专利针技术 共有30种针供选择 与斯坦福大学共同发展 专利 pin, 带样稳定,样品利用率高 单次带样可连续点样达200--1500次 特殊不锈钢材料,适用于各种溶液 实际点样直径75--250um,可根据不同样品选择相应pin 相当容易更换pin和pin head以适应不同需要 * 基因芯片点样的方式 非接触式点样适合于蛋白芯片的制作 它是以电磁阀或压电原理将样品直接喷至固相支持物表面 * 非接触式喷点技术 Thermal Solenoid 螺线管 Piezoelectric D P * Synquad:通过高分辨率注射器泵和微螺线管阀门有机结合起来精确控制滴液 Piezoelectric:用压电晶体将液体从孔中喷出的压电技术,两个压电晶体同时加脉冲通电触发这两个压电晶体往喷管中间变形挤压喷管侧壁,喷管出现收缩压迫液体从喷嘴喷出。 D P * 非接触式点样
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