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第8章 肠杆菌科(一) 苏州大学附属第二医院检验科 刘婷婷 掌握 肠杆菌科的共同生物学特性; 革兰阴性杆菌的鉴定程序; 大肠埃希菌的基本特性及检验程序; 沙门菌、志贺菌的基本特性、检验程序及血清学试验; 概念:肠热症, S-R变异 了解 微生物学检验程序; 肠杆菌科细菌分类; 大肠埃希菌、沙门菌、志贺菌的临床意义; 耶尔森菌的基本特性和临床意义。 肥达试验。 肠杆菌科细菌占临床分离菌总数的50%; 肠杆菌科细菌占临床分离的革兰阴性杆菌总数的80%; 近50%的菌血症、70%的泌尿系感染和大量肠道感染、腹腔和盆腔感染均由肠杆菌科细菌引起。 分类 基本特性 共同生物学特性: 革兰阴性杆状或球杆状,无芽孢、多有鞭毛,致病性菌株多有菌毛; 兼性厌氧,营养要求不高; 发酵葡萄糖、触酶阳性、氧化酶阴性、可将硝酸盐还原至亚硝酸盐。 不耐热,不耐干燥,对一般化学消毒剂敏感,对低温有耐受力,耐胆盐(并能抵抗染料的抑菌作用,此特性被用于制作肠道选择培养基)。 微生物学检验程序 鉴定步骤 应遵循科、属、种的次序,与其他革兰阴性杆菌进行鉴别。 1、科鉴别: 鉴定步骤 2、科内鉴别: 仪器或商品化试剂盒鉴定 手工鉴定: 根据苯丙氨酸脱氨酶和VP试验将14个菌属分为三个组: 苯( - )VP( - ):埃希菌属、志贺菌属、沙门菌属、枸橼酸菌属、爱德华菌属; 苯( - )VP( + ):克雷伯菌属、肠杆菌属、哈夫尼亚菌属、泛菌属、沙雷菌属、耶尔森菌属; 苯( + )VP( - ):变形杆菌属、摩根菌属、普罗维登斯菌属。 抗原成分 肠道感染 为不稳定的蛋白质抗原,加热或乙醇处理均被破坏。 有两个相: 第一相特异相,a~z表示; 第二相非特异相,1、2、3表示。 同时有第一相、第二相H抗原的细菌称双相菌。仅有一相者称单相菌。 新分离的伤寒及丙型副伤寒常带有此抗原。 位于菌体的最表层,有抗吞噬及保护细菌免受相应抗体和补体的溶菌作用。 Vi抗原存在可阻止O抗原与相应抗体发生凝集,故在沙门菌血清学鉴定时需事先加热破坏Vi抗原。 抵抗力不强,加热60℃1小时或65 ℃ 15~20分钟即被杀死。 水中能存活2~3周,粪便中可存活1~2个月。 对胆盐和煌绿等染料有抵抗力。因此可用于制备沙门菌的选择培养基。 血清学分型 先用多价O抗血清(A-F)进行分群; 多价凝集后,再用分别代表每个O血清群的单价因子血清定群; 再用H因子血清检查第1相和第2相H抗原。 特别注意: 与多价抗血清不凝集时,必须再对Vi抗原进行凝集试验。 也可在玻璃试管内用生理盐水将细菌制成浓菌液,放入沸水中加热15~30分钟,冷却后再次做凝集试验。(煮沸处理能破坏菌体表面的Vi抗原。) 如多价抗血清不凝集且Vi抗原阴性者不考虑为沙门菌。 兼性厌氧,最适生长温度为37℃,最适pH为7.2~7.4。 营养的要求不高,能在普通培养基上生长。 在肠道鉴别培养基上形成乳糖不发酵、中等大小、无色半透明的菌落,宋内志贺菌常形成粗糙型菌落。 KIA(K A--) IMViC(++--) MIU(-+-) 血清学分型 我国现有的定群及定型诊断血清包括: A群痢疾志贺菌1、2型; B群福氏志贺菌1~6型; C群鲍特志贺菌1~6型; D群宋内志贺菌。 一、分类 3种人类致病菌: 鼠疫耶尔森菌 小肠结肠炎耶尔森菌 假结核耶尔森菌 其他8种可从临床标本中分离到: 弗氏耶尔森菌 中间耶尔森菌 克氏耶尔森菌 奥氏耶尔森菌 伯氏耶尔森菌 莫氏耶尔森菌 罗氏耶尔森菌 鲁氏耶尔森菌 二、基本特性 形态特征 培养特性 生化反应 三、临床意义 四、微生物学检验 鼠疫耶尔森菌传染性极强,应严格遵守操作规程,采取严格的防护措施。 一旦疑为本菌,应立即向CDC报告,并将菌种送专业实验室进一步鉴定。 鼠疫的确诊主要依赖病原学诊断,须经全面生化反应、噬菌体裂解试验和动物试验才能作出最终鉴定。 第8章 肠杆菌科(二) 苏州大学附属第二医院检验科 刘婷婷 掌握 克雷伯菌属的基本特性及微生物检验; 肠杆菌属、沙雷菌属的生化反应; 克雷伯菌属、肠杆菌属、沙雷菌属三种间的鉴别; 变形杆菌属的基本特性及与类似菌的鉴别; 迁徙现象 了解 各菌属的临床意义; 枸橼酸杆菌属的特征与鉴定; 各菌属种间鉴定试验。 克雷伯菌属 一、分类 临床常见主要包括: 肺炎克雷伯菌(K.pneumoniae) 肺炎亚种(subsp. pneumoniae) 臭鼻亚种(subsp. ozaenae) 鼻硬结亚种(subsp. rhinoscleromatis) 产酸克雷伯菌( K.oxytoca ) 二、基本特性 形态特征 革兰阴性杆菌 单个、成双
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