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显微操作技术 显微操作技术(micromanipulation technique)： 高倍复式显微镜下利用显微操作器进行细胞或早期胚胎操 作的一种方法 显微操作技术的种类： 中国医科大学科学实验中心 细胞核移植 显微注射嵌合体技术胚胎移植显微切割 主要仪器设备: 显微注射法（显微注射法 （microinjection）是利用管尖极细（） 0.1至0.5 μm） (1).显微拉针仪(micropipete puller):水平式和垂直式：水 显微注射法显微注射法 （（ ）） 的玻璃微量注射针，将外源基因片段直接注射到原核期胚或培养的 平式拉针器靠水平设置的齿轮或弹簧牵动传动带产生的 细胞中，然后藉由宿主基因组序列可能发生的重组 拉力;垂直式拉针器的拉力来自向下的吸力. 先将玻璃毛 （rearrangement）、缺失（deletion ）、复制（duplication ）或易 细管加热到其熔化的温度，再将其拉制成所需的合适大 位（translocation ）等现象而使外源基因嵌入宿主的染色体内。 小的直径和锥形，微量移液管小头的直径（小至0.2微米, 显微注射:根据显微注射器把外源性物质(从大分子物质到细胞群)注 与显微操纵器的高精度相关），它可以用于精准的移 射部位的不同,分为原核(核)内注射, 细胞质注射(cytoplasmic injection), 精子注射和囊胚腔注射，原核(核) 内注射(pronuclear or 液。这种精确度可以为各种类型和任意大小的细胞提供 nuclear injection) 亚皮克升级或0.1微米(micron)范围内的精确的、重复性 良好的细胞内和细胞旁注射。 倒置显微镜倒置显微镜 倒置显微镜倒置显微镜 (2)煅烧仪(微熔灯)(microforge):设有可调的加热原件和 照明控制器,是制作注射针和把持针的工具,将注射针和 位相差(phasecontrast) 倒立式显微镜 把持针煅烧成所需的形状 特点是可以观察未经染色的透明标本和活细胞，位相差显微镜的 (3)显微磨针(尖)仪(microgrinder):加工注射针口径的仪 基本原理是利用透明细胞检体内部折射率各不相同，把透过标本 的可见光的光程差变成振幅差，从而提高了各种结构间的对比 器,其中装有可变速的转轮,转轮在磨石或砂纸面上将拉 度，得到明暗对比的效果，使的透明活细胞各种结构内部细节在 好的毛细玻璃管端部磨成平整的斜面 亮背景视野中变得清晰可见