微生物限度记录2015.docVIP

微生物限度检查记录(二) 编号：SMP-09-00702-e-1 检品名称： 检品规格： 检品批号： 取样日期： 检验日期： 报告日期： 检验依据：《中国药典》2015年版四部《非无菌产品微生物限度检查》 仪器：隔水式恒温培养箱 型号： 编号：RHBC-ZK- 霉菌培养箱 型号： 编号：RHBC-ZK- 恒温培养箱 型号： 编号：RHBC-ZK- 1、需氧菌、霉菌和酵母菌 供试品制备：取供试品 g，加稀释液 ml，用适宜的方法混匀，作为1：10供试品溶液。取1：10供试品溶液1ml，加稀释液至10ml，得到1：100供试品溶液。取1：100供试品溶液1ml，加稀释液至10ml.得到1：1000供试品溶液。按薄膜过滤法进行检查。（稀释液,冲洗液：0.9％无菌氯化钠-蛋白胨缓冲液） 观察结果： 需氧菌数30～35℃ 培养3～5天 霉菌、酵母菌数20～25℃培养5～7天 胰酪大豆胨琼脂培养基，批号： 沙氏葡萄糖琼脂培养基，批号： 稀释倍数 平皿号 培养时间 培养时间 10–1 10–2 10–3 阴性对照 10–1 10–2 阴性对照 1 2 1 2 1 2 1 2 1 2 1天 1天 2天 2天 3天 3天 4天 4天 5天 5天 6天 7天 平均数 报告数 标 准 需 氧 菌 数 每1g不 得 过 cfu， 霉 菌 及 酵 母 菌 数 每1g不得过 cfu 2.大肠埃希菌： 取上述1：10的供试液10ml，接种至胰酪大豆胨液体培养基中，混匀，30～35℃ 培养18～24小时。取上述培养物1ml接种于100ml麦康凯液体培养基中，42～44℃培养24～48小时。取麦康凯液体培养物划线接种于麦康凯琼脂培养基平板上，30～35℃培养18～72小时。 观察结果： 供试液 阳性对照 阴性对照 麦康凯琼脂培养基 乳糖发酵试验 靛基质试验（I) 甲基红试验（M） 乙酰甲基甲醇生成试验（V-P) 枸橼酸盐利用试验（C） 结果 （标准：不得检出） 3.耐胆盐革兰阴性菌： 取供试品，用胰酪大豆胨液体培养基作为稀释剂制成1:10供试液，混匀，在20～25℃培养约2小时。 取上述预培养物10ml接种至100ml肠道菌液体培养基中，30～35℃培养24～48小时后，划线接种于紫红胆盐葡萄糖琼脂培养基平板上，30～35℃培养18～24小时。 取相当于0.1g、0.01g和0.001g（或0.1ml、0.01ml和0.001ml）的供试品的预培养物接种至 ml的肠道菌液体培养基中，30～35℃培养24～48小时。取上述培养物分别划线接种于紫红胆盐葡萄糖琼脂培养基平板上，30～35℃培养18～24小时。 观察结果： 定性试验 供试液 阳性对照 阴性对照 紫红胆盐葡萄糖 琼脂培养基 定量试验 供试液 阳性对照 阴性对照 10–1 10–2 l 10–3 紫红胆盐葡萄糖 琼脂培养基 结果 （标准：每1g不得过100cfu） 4.沙门氏菌 取供试品10g或10ml，直接接种到200ml胰酪大豆胨液体培养基中，混匀，30～35℃培养18～24小时。取上述培养物0.1ml接种至10mlRV沙门增菌液体培养基中，30～35℃培养18～24小时。取少量RV沙门增菌液体培养物划线接种于木糖赖氨酸脱氧胆酸盐琼脂培养基平板上，30～35℃培养18～48小时。 若上述平板上有疑似菌落生长，用接种针挑选疑似菌落于三糖铁琼脂培养基高层斜面上进行斜面和高层穿刺接种，培养18～24小时。 观察结果： 项 目 供试品 阳性对照 阴性对照 木糖赖氨酸脱氧胆酸盐琼脂培养基 三糖铁琼脂培养基斜面 结 果 （标准：每10g不