甘蔗蜡提取物对对比剂肾病大鼠的保护作用.docVIP

PAGE PAGE 1 甘蔗蜡提取物对对比剂肾病大鼠的保护作用 　　摘要：为了研究甘蔗蜡提取物多廿烷醇（Policosanol）对对比剂肾病（Contrast-inducednephrpathy，CIN）大鼠的保护作用，将32只Wistar大鼠随机分为4组，每组8只，分别为正常对照组（C），甘蔗蜡提取物多廿烷醇组（P）、对比剂组（Contrastmedia，CM）和甘蔗蜡提取物多廿烷醇+对比剂组（PCM）。通过尾静脉分别注射吲哚美辛（10mg/kg）、N-硝基-L-精氨酸甲酯（L-NAME，10mg/kg，15、30min各注射1次）、高渗性对比剂60%泛影葡胺（6mL/kg）诱导对比剂肾病。测定肾功能参数，进行肾组织形态学检查。结果表明，与CM组相比，PCM组大鼠血清肌酐显著下降（P0.05），内生肌酐清除率显著上升（P0.05），大鼠肾切片肾小管坏死和髓质充血都显著减少（P 　　关键词：多廿烷醇（Policosanol）；对比剂肾病（Contrast-inducednephrpathy，CIN）；大鼠；保护作用 　　中图分类号：R-33文献标识码：A文章编号：0439-8114（2013）03-0610-03 　　随着近年来迅速崛起的心、脑血管疾病介入治疗学和外周放射介入治疗以及多种医学影像学检查技术的发展，含碘对比剂大量应用于临床，由此引起的急性肾损伤已成为不可忽视的临床问题。Darwish[1]研究表明，对比剂肾病（Contrast-inducednephrpathy，CIN）在非选择性人群中的发病率并不高，但仍占医院临床中获得性肾功能损害原因的第三位，占医源性肾病发病率的11%（仅次于肾灌注不足和肾毒性药物所致的肾病），死亡率达14%。CIN也是增加冠状动脉介入诊疗术患者死亡率的一个独立危险因素。 　　CIN已经成为医源性急性肾衰的主要原因之一[2-4]，而目前对于CIN尚无有效的治疗药物及措施，因此如何降低CIN的发病率及病死率成为近年来的研究热点。甘蔗蜡提取物多廿烷醇（Policosanol）具有稳定易损斑块、改善内皮功能、抑制炎症细胞的作用；另外，多廿烷醇还可减少缺血状态，降低血管紧张素Ⅱ诱导的急性肾衰[5，6]。基于多廿烷醇的这些作用，假设他汀类药物能够预防对比剂所诱导的急性肾功能减退，因此本研究通过建立CIN大鼠模型，验证多廿烷醇对CIN是否具有保护作用。 　　1材料与方法 　　1.1试验分组 　　选择32只7月龄的Wistar大鼠，雌雄各半，随机分为4组，每组8只，分别为正常对照组（C），甘蔗蜡提取物多廿烷醇组（P）、对比剂组（Contrastmedia，CM）、甘蔗蜡提取物多廿烷醇+对比剂组（PCM）。 　　1.2试验方法 　　1）C组采用普通饲料喂养，CIN诱导试验开始时，尾静脉等量注射生理盐水，共注射3次，每隔15min注射一次。 　　2）P组采用普通饲料+多廿烷醇（2mg/kg?晚）喂养，共5d。CIN诱导试验开始时，尾静脉等量注射生理盐水，共注射3次，每隔15min注射1次。 　　3）CM组采用普通饲料喂养。开始CIN诱导试验时，尾静脉分别注射：吲哚美辛（10mg/kg）；N-硝基-L-精氨酸甲酯（L-NAME，10mg/kg，15、30min各注射1次）；高渗性对比剂60%泛影葡胺（6mL/kg）。 　　4）PCM组采用普通饲料+多廿烷醇（2mg/kg?晚）喂养，共5d。开始CIN诱导试验：尾静脉注射吲哚美辛（10mg/kg）；N-硝基-L-精氨酸甲酯（L-NAME，10mg/kg，分别在15、30min各注射1次）；高渗性对比剂60%泛影葡胺（6mL/kg）。 　　在试验第24、48小时各收集1次尿液样本，试验第48小时用氯胺酮（50mg/kg）腹腔麻醉后，剖开腹腔，下腔静脉采血，2000r/min离心10min，取上清液-80℃保存。 　　1.3指标测定与形态学检查 　　1）肾功能参数测定：①分光光度剂测定血、尿中肌酐含量。②离子选择电极测定血、尿中钠含量。③内生肌酐清除率（CrCl）按下式计算：内生肌酐清除率=尿肌酐浓度×尿量/血肌酐浓度。④钠分次排泄率（FENa）按下式计算：FENa=（尿钠/血钠）×（血肌酐/尿肌酐）×100%。 　　2）肾脏组织形态学检查：所有大鼠在给药后48h腹腔注射戊巴比妥钠（100mg/kg），麻醉后取出肾脏，经4℃预冷生理盐水反复灌洗后切除，切取0.3cm×0.2cm×1.0cm肾皮质置于4%多聚甲醛溶液中固定4h，常规石蜡包埋，切取3μm石蜡切片，分别进行HE染色，光镜下观察。对肾小管坏死、蛋白管型和髓质充血程度进行半定量分析。 　　1.4统计学分析 　　采用SPSS15.0进行统计分析，结果以平均数±标准差表示。计量资料组内、组间比较用t检验或方