2012春(2)分析前处理.pptVIP

5. 影响薄层色谱分离效率的因素主要有那几点？ （1） 展开剂的选择和移动速度：展开剂在一特定吸附剂上移动的速度与其极性和粘度有关，因此选择合适的溶剂或混合剂作展开剂达到适宜的展开速度是很重要的。 （2）、吸附剂的颗粒大小：吸附剂颗粒小，分离效率好；吸附剂颗粒大小与展开的长度要协调好；颗粒大展开剂量推动过速而影响分离效果，则展开距离要延长。 （3） 、合适的展开距离：吸附剂颗粒在30μm时，展开距离以10-15厘米为最适宜。 （4）、点样时应使用样本浓缩液，样点的直径尽可能小。 吸附剂的活度和含水量 活性级别 硅胶含水量（%） 氧化铝含水量（%） Ⅰ 0 0 Ⅱ 5 3 Ⅲ 15 6 Ⅳ 25 10 Ⅴ 38 15 常用的氧化铝和硅胶活度为Ⅱ-Ⅲ级。 斑状样品点样的一般点样位置（a = 20mm, b = 10mm, c =两起点之间的距离。 条状样品点样的一般点样位置（a = 20mm, b = 10mm, c = 两起点之间的距离，d = 条的长度）。 点样原点的大小对最后斑点面积的影响较大，故必须严格控制，对于定量分析（按斑点面积定量）时尤其如此，对于较稀的样品溶液在原点进行多次滴加时，更须注意。 4、 展开： 方法： 饱和槽展开和不饱和槽展开 多次展开和一次展开： 用展开剂对薄层展开一次，称为单次展开。若展开一次后分离效果不好，可把薄层板自层析缸中取出，吹开去展开剂，重新放入盛有另一种展开剂的缸中进行第二次展开。 双向和单向展开： 下行展开和上行展开： 是用滤纸条把展开剂引到薄层的顶端使其向下流动，当流到薄层的下端尽头后，再滴到层析缸的底部而贮积起来。 盖子 层析缸 溶剂 薄层板（侧面） 薄层层析装置 1 温度 薄层色谱分析一般在室温中进行。对这过程，温度在20 - 25oC算不上是临界值。 在这过程中无短期的温度波动才是更为重要（避免抽风）。展开室应放置在无直射阳光和不通风处。温度波动对层析结果不利，故不应将展开室放在靠近窗口或热源处。 展开时应注意的几个参数 2 空气湿度 空气湿度极高或极低主要影响有非极性溶剂 体系的无机涂层。相对空气湿度高于70-80%会影响薄层钝化，使Rf值增加。样品点样后，TLC薄层可置放在适当的硫酸和水的混合物的上面不少于30分钟，调整至指定的相对湿度。 另一方面，在样品点样前，TLC/HPTLC板可在105oC再活化30分钟进行干燥。然后薄层必须用一块玻璃板保护起来，只有起点区露出以便于样品点样。 若空气太干燥，可在干燥器中将TLC/HPTLC薄层置于水的上方以达到所要求的状况。 （1）显色的一般原则： 一看、首先在日光下观察，画出有色物质的斑点位置； 二照、在紫外灯下观察有无暗斑或荧光斑点 三碘、大部分有机物会吸附碘可逆的产生棕色或黄色斑点 四显、既无色有无紫外吸收的物质，可用显色剂显色 5、显色 （2）显色剂及配制方法 （3）常用的几种显色方法 ① 蒸气显色 ??????????? ? 利用一些物质的蒸气与样品作用而显色，例如，固体碘、浓氨水、液体溴等易挥发物质放在密闭容器内（标本缸、玻璃筒），然后将挥发除去展开剂的薄层放入其中显色。 显色时间与灵敏度随化合物不同而异，多数有机物遇碘蒸气能显黄-黄棕色斑点。 显色作用是碘溶解于测定的化合物，或与化合物发生加成作用，但多数是化合物对碘的吸附作用，是一种非破坏性的显色方法。因此显色后在空气中放置，碘挥发，斑点即褪色。 ②?与显色剂反应显色 将显色剂配成一定浓度的溶液，用喷雾的方法均匀喷洒在薄层上。应注意： 喷雾器与薄层相距最好2-3尺，不可太近，这样才能使微细雾点均匀喷洒在薄层上。 在显色之前最好将展开剂挥发除尽，以避免干扰。但未加粘合剂的薄层，应趁展开剂未干前喷雾显色，以免吸附剂被吹散。 ③荧光显示 有些化合物本身发荧光，展开后待溶剂挥去即可在紫外灯下直接观察荧光斑点。 有的化合物需在留有少许溶剂的情况下方能显出荧光；有的化合物本来荧光不强，但在碘蒸气中熏一下再观察其荧光，灵敏度有所提高；有的化合物需要与一试剂作用以后才显出荧光。 ④ 荧光板显示 在制薄层板时，在吸附剂中混和无机发荧光物质，则展开后在紫外光灯下化合物掩盖了板上的荧光而显出斑点。 一般说来，荧光显示法比显色法灵敏度较高，但需要紫外灯。 （4）影响Rf值的因素（Rf value 写做Rf值，主要是层析法的用词。源自流速：rate of flow）。 吸附剂的性质和质量。吸附剂的活度。 取样量的大小。 展开槽的饱和程度。 边缘效应。 薄层的厚度和薄厚不均。 展开剂或样品中的杂质（如水分等）会影响Rf值。 作 业 在农药样品分析之前应该做那些了解工作以便设计实验方案? 一、了解农药有效成分的理化性状 （1）热稳定性、挥发性和极性（判断采用GC法、TLC