第十章DNA的生物合成（复制）tianx.pptVIP

DNA生物合成过程 复制过程动画* ? 真核生物每个染色体有多个起始点，是多复制子复制。复制有时序性，即复制子以分组方式激活而不是同步起动。 ? 复制的起始需要DNA-polα（引物酶活性）和polδ（解螺旋酶活性）参与。还需拓扑酶和复制因子(replication factor, RF)。 ? 增殖细胞核抗原(proliferation cell nuclear antigen, PCNA)在复制起始和延长中起关键作用。 逆转录 cDNA合成* DNA损伤（突变）与修复 DNA Damage (Mutation) and Repair 第五节 DNA突变具体指个别dNMP残基以至片段DNA在构成、复制或表型功能的异常变化，也称为DNA损伤(DNA damage)。 从分子水平来看，突变就是DNA分子上碱基的改变。 DNA损伤 一、突变的意义 （一）突变是进化、分化的分子基础 （二）突变导致基因型改变 （三）突变导致死亡 （四）突变是某些疾病的发病基础 DNA损伤 二、多种化学或物理因素可诱发突变 大量的突变属于自发突变，发生频率只不过在10-9左右。但由于生物基因组庞大，细胞繁殖速度快，因此它的作用是不可低估的。 实验室用来诱发突变，也是生活环境中导致突变的因素，主要有物理和化学因素。 物理因素 :紫外线(ultra violet, UV)、各种辐射 UV 化学因素 三、突变的分子改变类型 错配 (mismatch) 缺失 (deletion) 插入 (insertion) 重排 (rearrangement) 框移 (frame-shift) DNA分子上的碱基错配称点突变(point mutation)。 自发突变和不少化学诱变都能引起DNA上某一碱基的置换。 点突变发生在基因的编码区，可导致氨基酸改变。 （一）错配可导致编码氨基酸的改变 镰形红细胞贫血病人Hb (HbS) β亚基 N-val · his · leu · thr · pro · val · glu · · · · · · C 肽链 CAC GTG 基因 正常成人Hb (HbA)β亚基 N-val · his · leu · thr · pro · glu · glu · · · · · · C 肽链 CTC GAG 基因 镰形红细胞贫血病人 HbA：N’ Val-His-Leu-Thr-Pro-Glu-Glu-Lys HbS： N’ Val-His-Leu-Thr-Pro-Val-Glu-Lys 正常红细胞 镰状红细胞贫血症 * * * （二）复制的延长:领头链连续复制，随 从链不连续复制 复制的延长指在DNA-pol催化下，dNTP以dNMP的方式逐个加入引物或延长中的子链上，其化学本质是磷酸二酯键的不断生成。 DNA生物合成过程 5 3 5 dATP dGTP dTTP dCTP dTTP dGTP dATP dCTP OH 3 3 DNA-pol 领头链的合成:领头链的子链沿着5?→3?方向可以连续地延长。 随从链的合成 同一复制叉上领头链和随从链由相同的DNA-pol催化延长 复制过程简图 原核生物基因是环状DNA，双向复制的复制片段在复制的终止点(ter)处汇合。 ori ter E.coli 82 32 ori ter SV40 50 0 （三）复制的终止 5? 5? 5? RNA酶 OH P 5? DNA-pol Ⅰ dNTP 5? 5? P ATP ADP+Pi 5? 5? DNA连接酶 随从链上不连续性片段的连接 二、真核生物的DNA生物合成 （一）复制的起始与原核基本相似 （二）真核生物复制的延长发生DNA聚合酶α/δ转换 DNA-pol δ和pol α分别兼有解螺旋酶和引物酶活性。在复制叉及引物生成后，DNA-pol δ通过PCNA的协同作用，逐步取代pol α，在RNA引物的3?-OH基础上连续合成领头链。随从链引物也由pol α催化合成。然后由PCNA协同，pol δ置换pol α，继续合成DNA子链。 染色体DNA呈线状，复制在末端停止。 复制中岡崎片段的连接，复制子之间的连接。 染色体两端DNA子链上最后复制的RNA引物，去除后留下空隙。 （三）复制的终止 DNA生物合成过程 DNA生物合成过程 5? 3? 3? 5? 5? 3? 3? 5? + 5? 3? 3? 3? 3? 5? 5? 5? 线性DNA复制的末端 端粒(telomere) 指真核生物染色体线性DNA分子末端的结构。 功能 ? 维持染