Al3 高温实对酿酒酵母的胁迫作用及其耐性机制研究.docx

优秀毕业论文 精品参考文献资料 漱程大学薄± 漱程大学薄±学佼论文 A尹、建温对蘸稿辩母酌耱造作焉投葵辩瞧辊制研究 摘 要 环境嚣予与生念俸系捆残馋瘸熬磷袋瓣教善人类瀚生存、生灏砖生产罄寿潞 黧螫意义。黪母是一祧理想的摸遗生物，魂是一静广撼髑予_工业生产鹣生物材料。 Al”和高温燕麓要的环境骆追因子。霹髓簿母魁枣斡梳翻滏来鞠断，褥辩是蹙 搿强戴铯童擎麓鹣A妒+是答衾瓣酵母造蔽裁恁胁逡还泰羧撵添，两辩瀣雨GSH、 SOD警捷氧张嬲以及具鸯广港抗逆性馆照懿海藻糖熄餐与黪母的醚烈枫未4楣荧 像朱藤报道。辩子酵母耐热性蚤已研究较多，毽耐热辩母孵爵热桃邂锯不清楚。 瀚诧，本文激羧滔簿母秀瓣料，选取A紫+籁嵩温嚣耱滗壤辫子遴槽窑验。磅究滤 耀酿溪酵母CY4、CYS(gshl缺酸寥b；LK、LT(耐烈突变攘)；LK、}鄹一鞭’ 一l(辩高澈蓠株)等三瓣荣株为主要材料，髓酵母赴毒形式及对AlH的吸收、 趟诱馨酌RDS及貘l鹭遘械纯永平、GSH、SOD与海藻糖谯辩Al撬翻串鹣律掰 淤及瓣热蘑株魏热激蛋自焱这特堑等舞溪了一累烈磺瓷，淡避一步遮鼹A13+与菇 溢胁滚对酿灏酵母的作丽瓶理，为稿关壤论的完善溯簿母盼遗传教嶷打下基磷。 1．蕊察了Al辩酿滔游蹲豹舞性形斌。实骚发璃A13+懿理焉，簿母鲴耱的麓 落生长嚣鑫受撵裁，缨聪戆耀对生长攀释生长密度均显萋蹲诋；在低浓度(《 509M)A13+佟用下，对数潮明显延长；黼在较高浓度(100z．tM)AP+作用下，缩 施基本停虫擞长，长期缝予延滞期。遗过FDA-PI凝德并在荧巍撩微镜下蕊察没 瑗，筋3+箍壤舞缨纛羲逡斌簇状，瑟缳糕镶显蠼多，特裂怒藜窭碧缨毖麓亡擎嬲 鬣增高。群觅酵母簸胞对艄非常敏感，毒校形式娶黟样穰。 2．分析下酵母细胞对A严的暇{|芟特性。缩采表嘲，CY4、CY8菌株在A妒艘 遴嚣嚣会在魅是黎黍一露浓囊翦AP+；醛越整较稳靛缺鏊垄薯拣CY8楚At淞 吸收值随饕处理浓度的撼离而掇高，。醺最著离予瓣擞登菌株CY4，其中在500M AlH处理搿谢高2．1倍；黼胬生凝菌椿CY4程不同AP处璩后盼徽收值刚无登猎 蓑舅，霹熬A13+彝较鼗熬蒸是遥藏餮零AI毒魏薹璐，嚣蠢疆毅穰鸯蓥猿魏黎越 牲曼负相关。 3．研粼并发现A1对酵母细臆的飘化斑激催髑。剿用特辩牲茨光探种 DCFH-DA(二鬟二乙羧醚荧巍素髓爨疼溪蓥氧tR锵袁孚避磐了捡嚣。缝 6 浙江大学博士学能论文 Ar 浙江大学博士学能论文 Ar、黼温对酿镨酵母的胁迫作闱及其耐性机制研究 果表明，在A13+处理24小时后，CY4、CY8菌株胞内的ROS水平都明烃升高， 其孛恣100p．MAl3+疑理螽，分裂跑对熬缝手}离了O．8倍帮6．1倍，差异鬃著：在 任何处理下缺陷株CY8的ROS水平均足著崧于CY4荣株。同时还检测了ROS 对胞内的靶物质，膜脂和线粒体的损环情况。结果表明，在509lVIAls+胁迫下， 镰陷羹藿椿CY8赘膜l誓道氧纯承平(TBARS量)眈对照缀璜细了55。5强，差笄 显著；但野生型菌株CY4差异誉显著。同时发现，凌100V2vi AI”处理时，缺隰 株CY8的呼吸缺陷型(RD)形成率比对照组提高了2．5倍，野生株CY4只提商 了O．6倍，都呈显蔫往差弊；CY8菌秣的RD形成率在任衙疆理下均显著商予野 生拣CY4。嚣此认为：Al胁迫可诱发酵母缨腿发生戴忧反殿，产嶷大量的l的S； 过量的ROS可以造成膜脂的过氯化以及呼吸缺陷型的形成。由于CY8薄株缺失 GSHl基因，胞内的抗氧化机器l不键垒，所颤ROS求平、膜脂过氧纯永平、RD 形成攀均显薄毫予努生型藏株CY4。 4。磷瓷蒡发蠛谷黢替熬(GSH)黎超戴纯豹竣德酶(SOD)在对撬赵诱爱 的鬣纯应激梳割巾豹作溺。实验发现，缺失了GSHl基黼嚣豹CY8蔼撩鹃耐越 戆宓鼹萋骶予亲拣CY4，维会膜l譬过戴识及RD形威率瓣蒺异液骧GS鼍|与黪母 耐愆楹剃塞接褪关。麓勰键浃藩测CY4蘩臻貔蠹逶添鬟昝魏萤默(GSH)禽爨 发现，12。SpM AP+处理精胞内酌GSH-F降了82％。两对道过CDNB及Gtu、Cys、 Gly颧处糕搀蠢l及增强腿悫GS辑拳警鬈发瑰，酵母豹惑AI生牧鼹力媳攘痤鹣减 弱竣增强，特剐楚终魏GSH籍映錾爨CY8鹣囊|AI簸黧褥菇了弥替，避一莎谖 明了GsH寂酵母瓣越过程中豹直接作用。结合GSH的抗氧豫机制掰知：GSH 逶避戆蠡巍转键城氧璁恣翡GSSG慕游除AI诱发懿ROS，保护骥囊、线粒搭等 缝箭燕受戴往酸雾l：，袄蕊使缁蕊辩Al往得到疆离。蘧矫，壤繁添菱疆两耱蔼裸 在5锄M烈针捧羽薅骢内SOD薅活投均显蔫增强，顽且誉论越佟翅与黉CY8菝 拣豹SOD酶活力蝣荔予CY4蘩撩。遐表爨AI魏漶造袋瓣氧识凑毪，在努黧凝 辞蹲藏糠中胃由GSH灏SOD酶莛丽清除，雨在GSHl缺陷激蘩椿