2018高考生物（全国通用）考前三个月文档讲义：专题10考点28基因工程、蛋白质工程和细胞工程.docx免费

[直击考纲]　1.基因工程的诞生(Ⅰ)。2.基因工程的原理及技术(含PCR技术)(Ⅱ)。3.基因工程的应用(Ⅱ)。4.蛋白质工程(Ⅰ)。5.植物的组织培养(Ⅱ)。6.动物的细胞培养与体细胞克隆(Ⅱ)。7.细胞融合与单克隆抗体(Ⅱ)。8.动物胚胎发育的基本过程与胚胎工程的理论基础(Ⅰ)。9.胚胎干细胞的移植(Ⅰ)。10.胚胎工程的应用(Ⅱ)。11.转基因生物的安全性(Ⅰ)。12.生物武器对人类的威胁(Ⅰ)。13.生物技术中的伦理问题(Ⅰ)。14.简述生态工程的原理(Ⅱ)。15.生态工程的实例(Ⅰ)。 考点28　基因工程、蛋白质工程和细胞工程 1．基因工程常考的3种基本工具 (1)限制性核酸内切酶：识别特定核苷酸序列，并在特定位点上切割DNA分子。 (2)DNA连接酶：①E·coli DNA连接酶只能连接黏性末端；②T4 DNA连接酶能连接黏性末端和平末端。 (3)载体：①能在宿主细胞内稳定存在并大量复制；②有一个至多个限制酶切割位点，便于外源DNA片段(基因)插入其中；③具有特殊的标记基因——以便对含目的基因的受体细胞进行筛选。 2．基因工程的4大操作程序 (1)目的基因的获取 ①从基因文库中获取。 ②PCR技术扩增 a．原理：DNA双链复制。 b．条件：模板DNA、引物、游离的脱氧核苷酸、热稳定的DNA聚合酶。 ③用化学方法直接人工合成。 (2)基因表达载体的构建 ①基因表达载体模式图 ②基因表达载体的构建过程 (3)将目的基因导入受体细胞 ①导入植物细胞：农杆菌转化法、基因枪法、花粉管通道法。 ②导入动物细胞：显微注射法。 ③导入微生物细胞：感受态细胞法(用Ca2＋处理)。 (4)目的基因的检测与鉴定 ①插入检测：DNA分子杂交。 ②转录检测：DNA—RNA分子杂交。 ③翻译检测：抗原—抗体杂交。 ④个体水平检测：抗性接种实验。 3．图解记忆蛋白质工程 4．比较记忆植物组织培养与动物细胞培养 项目 植物组织培养 动物细胞培养 取材 植物幼嫩部位 动物胚胎或出生不久的幼龄动物的器官或组织 过程 结果 获得植株个体，可以体现全能性 新的细胞，不形成个体，不体现全能性 条件 ①无菌；②营养；③适宜条件 ①无菌、无毒；②营养、血清等；③温度和pH；④气体环境：O2、CO2 5.植物体细胞杂交与单克隆抗体制备过程比较 步骤 植物体细胞杂交过程 单克隆抗体制备过程 第一步 原生质体的制备(酶解法) 正常小鼠免疫处理 第二步 原生质体融合(物理、化学法) 动物细胞融合(物理、化学、生物方法) 第三步 杂种植株的筛选与培养 杂交瘤细胞的筛选与培养 第四步 杂种植株的诱导与鉴定 单克隆抗体的提纯 相同点 ①两种技术手段的培养过程中都进行有丝分裂，都是无性繁殖，都可称为克隆，都不涉及减数分裂；②均为无菌操作，需要适宜的温度、pH等条件 (1)诱导融合的方法分别有哪些？融合的细胞类型有哪几种(仅考虑两两融合的细胞)? 提示　①诱导植物体细胞的原生质体融合的方法主要有离心、振动、电激或用聚乙二醇作为诱导剂。 ②动物细胞融合常用的诱导因素有聚乙二醇、灭活的病毒(诱导动物细胞融合的特有因素)、电激等。 融合的细胞类型：前者—AA、BB、AB。后者—瘤瘤、B瘤、BB。 (2)各自的原理分别有哪些？ 提示　前者有细胞膜的流动性和植物细胞的全能性，后者有细胞膜的流动性和细胞增殖。 6．掌握克隆动物培育的流程 7．理清单克隆抗体制备的过程 题组一　基因工程和蛋白质工程 1．(2017·全国Ⅰ，38)真核生物基因中通常有内含子，而原核生物基因中没有，原核生物没有真核生物所具有的切除内含子对应的RNA序列的机制。已知在人体中基因A(有内含子)可以表达出某种特定蛋白(简称蛋白A)。回答下列问题： (1)某同学从人的基因组文库中获得了基因A，以大肠杆菌作为受体细胞却未得到蛋白A，其原因是________________________________________________________________________ ________________________________________________________________________。 (2)若用家蚕作为表达基因A的载体，在噬菌体和昆虫病毒两种载体中，不选用______________作为载体，其原因是_____________________________________________。 (3)若要高效地获得蛋白A，可选用大肠杆菌作为受体，因为与家蚕相比，大肠杆菌具有____________________(答出两点即可)等优点。 (4)若要检测基因A是否翻译出蛋白A，可用的检测物质是________________(填“蛋白A的基因”或“蛋白A的抗体”)。 (5)艾弗里