25.病毒感染的检查方法与防治原则幻灯片课件.pptVIP

病毒感染的检查方法与防治原则南方医科大学公共卫生与热带医学学院 微生物学系张其威 PhDEmail：zhang.qiwei@QQ: 3910035;病原学诊断的意义;病毒感染的检查;一、标本的采集与送检;二、病毒的分离与鉴定;二、病毒的分离与鉴定;（一）病毒的分离培养 1.细胞培养（简述） 单层细胞培养（monolayer cell culture） 分类 悬浮细胞培养（suspended cell culture） 原代细胞（primary cell） 细胞种类 二倍体细胞（diploid cell） 传代细胞系（continuous cell line）;病毒的细胞培养;1.细胞培养;特点：①对多种病毒敏感 ②生长能力有限（20代）, 获取成本高 ③可携带潜伏病毒（EB）;;;2.鸡胚培养 采用孵化9～14天的鸡胚 绒毛尿囊膜（allantocherion） 痘苗病毒、人类疱疹病毒 尿囊腔（allantoic cavity） 接种部位 流感病毒、腮腺炎病毒 羊膜腔（amniotic cavity） 流感病毒的初次分离 卵黄囊（yolk sac） 嗜神经病毒 ;尿囊腔;2、鸡胚培养;;18;3.动物接种 应用：尚无敏感细胞的病毒培养（HCV等） 动物：兔、鼠、黑猩猩、猴等 优点：结果易观察，可建立动物模型 缺点：有饲养条件要求，费用高，动物 体内常带有潜伏病毒，安全性要求高;1．病毒增殖鉴定 (1)细胞病变效应（cytopathic effect, CPE ） ①细胞变圆、聚集、坏死、溶解或脱落等（多数病毒）； ②形成多核巨细胞或称融合细胞（麻疹病毒、巨细胞病毒、呼吸道合胞病毒等）； ③在培养细胞中形成包涵体（狂犬病病毒、麻疹病毒等）。 ;21;①细胞变圆、聚集、坏死、溶解或脱落;麻疹病毒感染细胞;③形成包涵体(inclusion body);腮腺炎病毒感染细胞;(3)干扰现象（interference）;(4)细胞代谢改变 细胞代谢变慢 pH改变 （adenovirus） ;2.病毒形态学鉴定;3.病毒血清学鉴定;;(2)免疫标记法（FIA、EIA/ELISA、RIA） ——多种病毒鉴定 (3)凝胶免疫扩散试验(gel immuno- diffusion test) ——多种病毒鉴定;4.病毒分子生物学鉴定;;;;(四) 新病毒的鉴定;三、病毒感染的血清学诊断;1.中和试验（neutralizing test）;2.补体结合试验 （complement fixation test）;四、病毒感染的快速诊断;（一）形态学检查;（二）病毒成分检测;;;;（三）早期抗体检测;第二节 病毒感染的特异性预防;灭活疫苗（inactivated vaccine） 活疫苗（living vaccine） 重组载体疫苗（recombinant carrier vaccine） 亚单位疫苗（subunit vaccine） 化学提取或人工合成疫苗 重组疫苗（recombinant vaccine） 核酸疫苗（nucleic acid vaccine）;二、人工被动免疫常用生物制品;第三节 病毒感染的治疗;核苷类药物作用机制之一;干扰RNA ; The Nobel Prize in Physiology or Medicine 2006for their discovery of RNA interference - gene silencing by double-stranded RNA;思考题