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如何得到35S标记的噬菌体和32P标记的噬菌体? 35S 32P 细菌(35S) 细菌(32P ) 噬菌体(35S) 噬菌体(32P ) 培养 细菌 培养 细菌 培养 噬菌体 培养 噬菌体 当煮沸杀死S型肺炎双球菌时,细胞中的DNA分子可断裂为多个片段,这种片段不能进行复制和表达,因而不能产生活的S型肺炎双球菌,小鼠没有生命危险。 将R型活菌与S型菌DNA分子片段混合后,当R型菌群数量增长达到高峰时,细菌会出现失去局部细胞壁的现象,S型菌DNA分子片段能进入R型菌体,R型菌转化为S型肺炎双球菌。 小资料:S型菌的DNA如何进入R型菌体内? DNA是遗传物质的间接证据(P48) 作为遗传物质,必须具备什么条件呢? 4)能够指导蛋白质的合成从而控制 生物的性状和新陈代谢 3)具有贮存巨大数量遗传信息的潜在 能力 2)结构比较稳定,但在特殊情况下又能发 生突变 1)在细胞生长和繁殖的过程中能够 精确的自我复制 给你以下生物,你认为选择哪些生物作实验材料较好?为什么? T2噬菌体 英国格里菲思 ——肺炎双球菌转化实验,1928年 R型菌 (菌落粗糙、无毒性) S型菌 (菌落光滑、有毒性) 多糖类荚膜 (具有保护作用) 菌落:单个微生物繁殖到一定程度可形成肉 眼可见的、有一定形态结构的子细胞 生长群体 S型菌 R型菌 病死 生活 S型菌 病死 生活 R型菌 加热杀死 格里菲斯的肺炎双球菌活体转化实验 活体肺炎双球菌转化实验, 1、实验①和 ②能说明什么问题? 2、实验①和 ③能说明什么问题? 3、实验④中小鼠死亡原因是什么?S型菌从哪里来? 4、以上实验能分析得出什么结论? ①S型菌+小鼠→小鼠死亡 ②R型菌+小鼠→小鼠活 ③加热杀死的S型菌→小鼠活 ④加热杀死的S型菌+R型菌+小鼠→小鼠死亡,有S型菌 思考 : 思考:要确认哪种物质是转化因子,实验的关键思 路是什么?需要具备怎样的技术? 从活的S型肺炎双球菌中抽提DNA、蛋白质和荚膜物质,分别与活的R型菌肺炎双球菌混合观察,R型菌是否有转化成S型菌 需要具备从S型肺炎双球菌中分离提出DNA、蛋白质和荚膜物质的手段。涉及细菌培养技术、物质的提纯和鉴定技术 DNA 蛋白质 多糖 脂质 RNA 离体肺炎双球菌转化实验——1944年 思考:为了进一步证明DNA使细菌发生转化,还可进行 什么样的实验? DNA+DNA酶 S型菌的DNA+DNA酶 艾弗里的实验引起了人们的注意,但并不是所有的人都信服这一结果。 1、虽然已经有科学家证明了DNA是染色体的主要成分之一,但人们仍然认为遗传与染色体上的蛋白质有关。这是因为蛋白质分子量大,结构复杂,其中20种氨基酸不同的排列组合将是各天文数字,可以作为一种遗传信息,且在不同生物体中,同源蛋白之间在结构特异性上叶存在着极大的差异,而DNA的分子量相对较小,只有4种不同的碱基,人们一度认为不同种的有机体的核酸只有微小的差异,因而形成一种观念,基因和染色体的活性成分是蛋白质 2、人们认为转化实验中的DNA并未能提的很纯,还附有其他物质,可能正是这些少量的特殊蛋白质在起转化作用 3、也有人认为即使转化因子确实是DNA,但DNA也可能只是对荚膜的形成起着直接的化学效应,而不是充当遗传信息的载体 实 验 二——噬菌体侵染细菌的实验,1952年 1、结构: 2、营养方式: 资料:T2噬菌体DNA比例为40%,组成元素是C、H、O、N、P;蛋白质比例60%,组成元素是C、H、O、N、S等。 想要研究DNA和蛋白质,对什么元素进行同位素标记最好? 被35S标记的噬菌体 被32P标记的噬菌体 被35S标记的噬菌体侵染细菌 被32P标记的噬菌体侵染细菌 搅拌后离心 搅拌后离心 离心后 离心后 上清液放射性高 沉淀物放射性很低 上清液放射性低 沉淀物放射性高 新形成的子代噬菌体中未检测到35S 新形成的子代噬菌体中检测到32P 噬菌体侵染细菌的实验过程及结果 35S标记的噬菌体 32P标记的噬菌体 1.感染 2.搅拌 3.离心 沉淀物的放射性很低 沉淀物的放射性很高 + + 上清液的放射性很高 上清液的放射性很低 1.实验目的?该实验所用方法的名称? 2.为什么选择35S和32P这两种同位素分别对蛋白质和DNA作标记? 能否同时对蛋白质和DNA作标记?能否用14C和18O标记? 3.如何将噬菌体进行同位素标记? 4.实验过程中搅拌和离心的
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