高考生物一轮复习 基因工程名师优质课件.pptVIP

(1)铁结合蛋白基因来自菜豆，且基因的脱氧核苷酸序列已知，可以用__________法获得此目的基因或用____________扩增目的基因。 (2)构建重组Ti质粒时，通常要用______________分别切割________。将重组Ti质粒转入农杆菌时，可以用________处理农杆菌，使重组Ti质粒易于导入。 (3)将含有重组Ti质粒的农杆菌与水稻愈伤组织共同培养时，通过培养基2的筛选培养，可以获得__________；培养基3与培养基2的区别是__________。检测培育转基因水稻的目的是否达到，需要检测转基因水稻__________。 要点探究 基础回顾 要点探究 提能演练 栏目链接 (4)为研究外源基因的遗传方式，将T0代植株上收获的种子种植成T1代株系，检测各单株的青霉素抗性。在检测的多数T1代株系内，抗青霉素植株与青霉素敏感植株的比例为3∶1，此结果说明外源基因的遗传符合________。有少数T1代株系的所有植株都表现为对青霉素感但其体内能检测到铁结合蛋白基因，造成这一结果最可能的原因是__________________,______________________。 要点探究 基础回顾 要点探究 提能演练 栏目链接 解析：(1)如果基因的脱氧核苷酸序列已知，可以用化学合成法获得此目的基因，再用PCR技术进行扩增。 (2)构建重组质粒的过程中，通常要用同一种限制酶分别切割质粒和含目的基因的DNA片段，使它们产生相同的黏性末端，然后再用DNA连接酶连接成重组质粒。将重组Ti质粒转入农杆菌时，可以用CaCl2溶液处理农杆菌成为感受态细胞，易于重组Ti质粒导入。 (3)质粒上的标记基因为青霉素抗性基因，因此通过培养基2的筛选培养，可以获得含有重组质粒的愈伤组织。 要点探究 基础回顾 要点探究 提能演练 栏目链接 (4)细胞导入目的基因后，可将该细胞认为是携带目的基因的杂合子，自交后代中，抗青霉素植株与青霉素敏感株的比例为3∶1，此结果说明外缘基因的遗传符合基因的分离定律。 答案：(1)化学合成(从基因文库中获取目的基因)　PCR (2)(同种)限制性核酸内切酶　含目的基因的DNA片段和质粒　CaCl2 (3)含有重组质粒(有青霉素抗性)的愈伤组织　生长素和细胞分裂素的浓度比例不同　(成熟)种子中铁含量 (4)基因分离定律　青霉素抗性基因没有表达(或青霉素抗性基因丢失) 要点探究 基础回顾 要点探究 提能演练 栏目链接 名师点睛 旋转法书写黏性末端 相同的黏性末端可以用DNA连接酶连接在一起，由于DNA的两条链反向平行，所以把某一黏性末端水平旋转180°，就是与之连接的黏性末端，如： 所以，书写时只需把黏性末端旋转180°，然后写出即可。 要点探究 基础回顾 要点探究 提能演练 栏目链接 考点2 基因工程的基本操作程序 要点探究 1.目的基因的获取。 (1)直接分离：从自然界已有的物种中分离，如从基因文库中获取。 (2)人工合成目的基因的常用方法： ①已知核苷酸序列的较小基因，直接利用DNA合成仪用化学方法合成，不需要模板。 ②以RNA为模板，在逆转录酶作用下人工合成。 基础回顾 要点探究 提能演练 栏目链接 (3)PCR技术(多聚酶链式反应)扩增目的基因。 PCR技术的基本原理： ①PCR反应成分：模板DNA，引物，四种脱氧核苷酸，耐高温DNA聚合酶，反应缓冲液，Mg2＋等。 ②PCR反应的基本步骤：变性→复性→延伸。 以上三个步骤为一个循环，每一循环的产物可作为下一个循环的模板，经过n次循环后，目的基因以2n的形式增加。 2.基因表达载体的构建——基因工程的核心。 (1)目的：使用的基因在受体细胞中稳定存在，并且可以遗传给下一代，同时，使目的基因能够表达和发挥作用。 要点探究 基础回顾 要点探究 提能演练 栏目链接 (2)基因表达载体组成。 要点探究 基础回顾 要点探究 提能演练 栏目链接 3．目的基因导入受体细胞。 要点探究 受体细胞种类 植物细胞 动物细胞 微生物细胞 (大肠杆菌) 常用方法 农杆菌转化法、基因枪法、花粉管通道法 显微注射技术 Ca2＋处理法 受体细胞 体细胞或受精卵 受精卵 原核细胞 转化过程 将目的基因插入Ti质粒的T－DNA上→导入农杆菌→侵染植物细胞→目的基因整合到受体细胞的DNA上，并稳定维持和表达其遗传性 将含有目的基因的基因表达载体提纯→取受精卵→显微注射→受精卵移植→获得具有新性状的动物 用Ca2＋处理受体细胞→感受态细胞→将重组表达载体与感受态细胞混合→感受态细胞吸收DNA分子 基础回顾 要点探究 提能演练 栏目链接 4.目的基因的检测与鉴定。 要点探究 类型 检测内容 方法 结果显示 分子检测 导入检测 目的基因是否进入受体细胞 DNA分子杂交(DNA和DNA