利用基因捕获杂交联合高通量测序技术探究垂体ACTH腺瘤的发病机制.pdf

学校代码： 10023 学 号：200801089 内部2 年 利用基因捕获杂交联合高通量测序技术探究 垂体ACTH 腺瘤的发病机制 专业年级： 北京协和医学院临床医学专业2008 级 姓 名： 辅 容 导 师： 龚凤英（教授） 朱惠娟（副教授） 北京协和医学院临床学院 内分泌科 完成日期： 2016-6-11 独创性声明 本人声明所呈交的学位论文是本人在导师指导下进行的研 究工作及取得的研究成果。论文中除了特别加以标注和致谢的 地方外，不包含其他人已经发表或撰写过的研究成果，也不包 含为获得其他教育机构的学位或证书而使用过的材料。与我一 同工作的同志对本研究所做的任何贡献均已在论文中作了明确 的说明并表示谢意。 学位论文作者签名： 签字日期： 年 月 日 学位论文版权使用授权书 本学位论文作者完全了解 北京协和医学院 有关保存、使 用学位论文的管理办法。有权保留并向国家有关部门或机构送 交论文的复印件和磁盘，允许论文被查阅和借阅。本人授权 北 京协和医学院 可以将学位论文的全部或部分内容编入有关数 据库进行检索，可以采用影印、缩印或扫描等复制手段保存、 汇编学位论文。 （保密的学位论文在解密后适用本授权书） 学位论文作者签名： 导师签名： 签字日期： 年 月 日 签字日期： 年 月 日 学位论文作者毕业后去向： 工作单位： 电话： 通讯地址： 邮编： 目 录 中文摘要1 Abstract3 英文缩略词表5 前 言6 实验材料与方法8 （一）研究对象及样本来源 8 1、研究对象8 2 、激素水平测定8 3、地塞米松抑制试验9 4 、双侧岩下窦静脉取血联合去氨加压素刺激试验9 5、垂体MRI 检查9 6、标本获取 10 （二）材料和试剂 10 1、仪器设备 10 2 、试剂 11 3、数据分析所用软件和网站 12 （三）DNA 提取和建库 13 1、样本DNA 提取 13 2 、DNA 检测 13 3、样品打断和纯化 13 4 、末端修复 14 5、末端加“A” 14 6、Adapter 连接 15 7、Non-Captured 样品Pre-LM-PCR 15 （四）目标区域选择和设计 16 （五）芯片杂交和洗脱 16 1、基因芯片杂交 16 2 、洗脱： 17 3、用LM-PCR 扩增捕获的DNA 18 （六）质控 19 （七）测序 19