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考纲内容
考纲解读
基因工程的原理及技术、基因工程的应用、蛋白质工程(Ⅱ)
理解基因工程的原理及技术,理解基因工程在动物、植物及微生物方面的应用,了解蛋白质工程的基本原理
命题预测
纵观近三年高考题,本专题主要考查基因工程的原理及技术、基因工程的应用、蛋白质工程等,预测2017年高考仍将主要以非选择题形式考查以上知识点。
知识网络
知识讲解
一、基因工程的原理及技术
1.基因工程的概念
(1)供体:提供目的基因。
(2)操作环境:体外。
(3)操作水平:分子水平。
(4)原理:基因重组。
(5)受体:表达目的基因。
(6)本质:性状在受体体内的表达。
(7)优点:克服远缘杂交不亲和的障碍,定向改造生物的遗传性状。
2.DNA重组技术的基本工具
(1)限制性核酸内切酶(简称:限制酶)
①主要是从原核生物中分离纯化出来的。
②作用:识别特定的核苷酸序列并切开特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键。
③结果:产生黏性末端或平末端。
(2)DNA连接酶
①种类:按来源可分为E?coli DNA连接酶和T4DNA连接酶。
②作用:将双链DNA片段“缝合”起来,恢复被限制酶切开的两个核苷酸之间的磷酸二酯键。
③DNA连接酶和限制酶的关系
(3)载体
①种类:质粒、λ噬菌体的衍生物、动植物病毒等。
②质粒的特点:能自我复制;有一个至多个限制酶切割位点;有特殊的标记基因。
3.基因工程的操作过程
(1)基因工程的操作步骤
①获取目的基因—a.从基因文库中获取;b.利用PCR技术扩增c.通过化学方法人工合成。
②基因表达载体的构建—a.目的基因;b.启动子;c.终止子;d.标记基因。
③将目的基因导入受体细胞—a.植物:农杆菌转化法、基因枪法、花粉管通道法;b.动物:显微注射技术;c.微生物:感受态细胞法。
④目的基因的检测与鉴定—a.利用DNA分子杂交技术检测目的基因的有无;b.利用分子杂交技术检测目的基因的转录;c.利用抗原—抗体杂交技术检测目的基因的翻译;d.利用个体生物学水平的鉴定检测重组性状的表达。
二、基因工程的应用及蛋白质工程
1.基因工程的应用
(1)基因工程与遗传育种
培育各种转基因植物和转基因动物,以提高其抗逆性及生长速度等。
(2)基因工程与疾病治疗
①基因工程药物:如用工程菌生产人的胰岛素、生长激素、干扰素和乙型肝炎疫苗等。
②基因治疗:向目标细胞中引入正常功能的基因,以纠正或补偿基因的缺陷,达到治疗的目的。
(3)基因工程与生态环境保护
科学家正在利用基因工程技术开发生物可降解的新型材料;培育转基因“超级细菌”,提高分解石油的能力;利用转基因微生物吸收环境中的重金属等。
2.蛋白质工程
(1)概念理解
①基础:蛋白质分子的结构规律及其与生物功能的关系。
②操作:基因修饰或基因合成。
③结果:改造了现有蛋白质或制造出新的蛋白质。
④目的:满足人类的生产和生活的需求。
(2)操作过程:从预期的蛋白质功能出发→设计预期的蛋白质结构→推测应有的氨基酸序列→找到相对应的脱氧核苷酸序列(基因)→基因表达→产生需要的蛋白质。
考点透析
考点1 基因工程的原理及操作技术
【典型例题】
以下有关基因工程的叙述,正确的是( )
A.在已知目的基因任意序列情况下,可采用PCR扩增技术获取目的基因
B.目的基因导入受体细胞最常用的方法是农杆菌转化法
C.可用一种或两种限制酶同时切割运载体和目的基因,便于两者连接
D.利用运载体上标记基因的相关特性就可检测出目的基因已导入受体细胞并成功表达
【答案】C
【名师点睛】基因工程误区警示
(1)一般情况下,用同一种限制酶切割质粒和含有目的基因的片段,但有时可用两种限制酶分别切割质粒和目的基因,这样可避免质粒和质粒之间、目的基因和目的基因之间的连接。
(2)目的基因进入受体细胞内,并且在受体细胞内维持稳定和表达的过程,称为转化。转化的实质是目的基因整合到受体细胞染色体基因组中。
(3)标记基因的作用——筛选、检测目的基因是否导入受体细胞,常见的有抗生素抗性基因、发光基因(表达产物为带颜色的物质)等。
(4)受体细胞常用植物受精卵或体细胞(经组织培养)、动物受精卵(一般不用体细胞)、微生物(大肠杆菌、酵母菌)等。要合成糖蛋白、有生物活性的胰岛素则必须用真核生物酵母菌(需内质网、高尔基体的加工、分泌);一般不用支原体,原因是它营寄生生活;一定不能用哺乳动物成熟的红细胞,原因是它无细胞核,不能合成蛋白质。
(5)基因表达载体中,启动子(DNA片段)≠起始密码子(RNA);终止子(DNA片段)≠终止密码子(RNA)。基因表达载体的构建是最核心、最关键的一步,在体外进行。
【变式训练】
下列关于基因工程的叙述,错误的是( )
A.可定向改变生物性状
B.工具酶有限制酶、DNA聚合酶
C.需要对目的基因进行检
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