分子克隆载体讲义.pptVIP

经重组DNA分子转化处理的受体菌在不含标记药物tc的琼脂培养基上培养，则含或不含重组DNA分子的受体菌都能长出菌落。 然后取菌落的一部分接种在含tc 的琼脂培养基上，不会长出菌落的原菌落才是真正在tcr基因区插入外源DNA片段的克隆子。 （为什么？） pUC质粒 pUC质粒系列是在pBR322基础上改建成的； 包括pBR322的ampr基因； 缺乏控制拷贝数的rop基因。 pUC的主要优点： （1）分子量更小，仅为2686bp，容纳外源DNA量增大；具有更高的拷贝数（每个细胞含500-700个拷贝）。 （2）含易于检测是否有外源DNA插入的标记基因LacZ，可利用?-互补原理进行蓝白筛选。 （3）多克隆位点区（MCS）由人工合成的多个单一酶切位点构成。 pUC18 pUC19 含四个部分： （1）来自pBR322的质粒复制起点（ori）； （2）ampr ; （3）大肠杆菌β半乳糖苷酶基因（lacZ）的启动子及其编码α-肽链的DNA序列； （4）多克隆位点（MCS） lacZ` Ori Ampr MCS Blue Whit