医学细胞生物学第10章细胞骨架.ppt

Kinesin-dept.transport: conyeys Mit(by KIF),Lys,Mv?ER or periphery.Cytosolic dynein-dept transport: conyeys elements of ER,late endosome, Lys?cell center * * * * * 深绿：微管 浅兰：内质网 黄色：高尔基体 上图：内质网抗体染色 下图：微管抗体染色 上图：高尔基抗体染色 下图：微管抗体染色 微管功能 ◆维持细胞形态 ◆细胞内物质的运输 ◆细胞器的定位 ◆鞭毛(flagella)运动和纤毛(cilia)运动 ◆纺锤体与染色体运动 维持细胞形态 用秋水仙素处理细胞破坏微管,导致细胞 变圆,说明微管对维持细胞的不对称形状是重要 的。对于细胞突起部分,如纤毛、鞭毛、轴突的 形成和维持, 微管亦起关键作用。 细胞内物质的运输 真核细胞内部是高度区域化的体系, 细胞中合成的 物质、一些细胞器等必须经过细胞内运输过程。这种运 输过程与细胞骨架体系中的微管及其Motor protein有关。 ·Motor proteins ·神经元轴突运输的类型及运输模式 ·色素颗粒的运输 Motor proteins 目前已鉴定的Motor proteins多达数十种。根据其 结合的骨架纤维以及运动方向和携带的转运物不同而分 为不同类型。胞质中微管motor protein分为两大类： 　　　　　驱动蛋白(kinesin):通常朝微管的正极方向运动 　　　　　动力蛋白(cytoplasmic dynein)：朝微管的负极运动　　 Kinesin与Dynein的分子结构 Kinesin与Dynein的运输方式 神经元轴突运输的类型 轴突运输的类型 鞭毛(flagella)运动和纤毛(cilia)运动 ·纤毛和鞭毛的运动形式 ·纤毛与鞭毛的结构 ·纤毛运动机制 三、中间纤维（intermediate filament,IF) 10nm纤维,因其直径介于肌粗丝和细丝之间, 故被命名为中间纤维。IF几乎分布于所有动物细胞，往往形成一个网络结构，特别是在需要承受机械压力的细胞中含量相当丰富。如上皮细胞中。除了胞质中，在内核膜下的核纤层也属于IF。 ●中间纤维的装配 ●中间纤维的成分与分布 ●中间纤维结合蛋白（ IFAP ）及其判定标准 ●中间纤维的功能 中间纤维的装配 ◆中间纤维装配过程　 ◆IF装配与MF,MT装配相比，有以下几个特点： ·IF装配的单体是纤维状蛋白(MF,MT的单体呈球形)； ·反向平行的四聚体导致IF不具有极性； ·IF在体外装配时不需要核苷酸或结合蛋白的辅助， 在体内装配后，细胞中几乎不存在IF单体(但IF的存在 形式也可以受到细胞调节，如核纤层的装配与解聚)。 中间纤维的成分与分布 IF成分比MF,MT复杂，具有组织特异性。 IF在形态上相似，而化学组成有明显的差别。 ◆中间纤维类型与分布 ◆中间纤维蛋白的表达具有严格的组织特异性 中间纤维分类与分布 中间纤维的功能 ◆增强细胞抗机械压力的能力 ◆角蛋白纤维参与桥粒的形成和维持 ◆结蛋白纤维是肌肉Z盘的重要结构组分， 对于维持肌肉细胞的收缩装置起重要作用 ◆神经元纤维在神经细胞轴突运输中起作用 ◆参与传递细胞内机械的或分子的信息 ◆中间纤维与mRNA的运输有关 第二节 细胞核骨架 ●核基质(Nuclear Matrix) ●染色体骨架 ●核纤层(Nuclear Lamina) 核基质(Nuclear Matrix) ●形态结构 ●成分 ●核骨架结合序列 ●功能 形态结构 ◆研究核骨架的分级抽提方法 非离子去垢剂溶解膜结构系统,胞质中可溶性成分随之流失; 再用Tween40和脱氧胆酸钠处理,胞质中的微管、微丝与一些蛋白结构被溶去,胞质中只有中间纤维网能完好存留;然后用核酸酶与0.25mol/L硫酸铵处理,染色质中DNA、RNA和组蛋白被抽提, 最终核内呈现一个精细发达的核骨架网络, 结合非树脂包埋-去包埋剂电镜制样方法,可清晰地显示核骨架-核纤层-中间纤维结构体系。 成 分 核骨架不象胞质骨架那样由非常专一的蛋白成分组成,核骨架的成分比较复杂,主要成分是核骨架蛋白及核骨架结合蛋白,并含有少量RNA。 ◆核骨架蛋白 ◆骨架结合蛋白 ◆其它 核骨架结合序列 ◆ DNA序列中的核骨架结合序列(matrix associated region