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原核细胞70S核糖体的A位、P位及mRNA结合部位示意图 anticodon codon 30S 与mRNA结合部位 P位(结合或接受肽基的部位) A位(结合或接受AA- tRNA的部位) 50S 5? 3? mRNA 真核和原核细胞参与翻译的蛋白质因子 阶段 原核 真核 功 能 IF1 IF2 eIF2 参与起始复合物的形成 IF3 eIF3、eIF4C 起始 CBP I 与mRNA帽子结合 eIF4A B F 参与寻找第一个AUG eIF5 协助eIF2 、 eIF3、eIF4C的释放 eIF6 协助60S亚基从无活性的核糖体上解离 EF-Tu eEF1? 协助氨酰-tRNA进入核糖体 延长 EF-Ts eEF1 ?? 帮助EF-Tu 、 eEF1?周转 EF-G eEF2 移位因子 RF-1 终止 eRF 释放完整的肽链 RF-2 蛋白质的合成 (1) 氨基酸的活化 (2) 原核生物多肽链的合成过程 (3) 多核糖体和核糖体循环 (4) 真核生物多肽链的合成 氨基酸的活化 氨基酸 ATP + 氨酰腺苷酸 E-AMP PPi 第一步 AMP 第二步 E 氨基酸的活化 3-氨酰-tRNA 氨酰- tRNA合成酶特点 ?专一性:一是对氨基酸有极高的专一性,每种氨基酸都有专一的酶,只作用于L-氨基酸,不作用于D-氨基酸。二是对tRNA 具有极高专一性。 ?校对作用:氨酰- tRNA合成酶的水解部位可以水解错误活化的氨基酸。 N-甲酰甲硫氨酰-tRNAtMet的形成 CHO-HN-CH-COO-tRNA CH2 CH2 S COO- +H2N-CH-COO-tRNA CH2 CH2 S COO- Met-tRNAtMet fMet-tRNAtMet N10-甲酰FH4 FH4 转甲酰酶 原核生物多肽链的合成过程 原核生物多肽链的合成分为三个阶段:肽链合成的起始、肽链的延伸、肽链合成的终止和释放。 ?肽链合成的起始 ?肽链的延长 ?肽链合成的终止及释放 肽链合成的起始 30S亚基? mRNA IF3- IF1复合物 30S? mRNA ? GTP- fMet –tRNA- IF2- IF1复合物 70S起始复合物 codon anticodon A位 P位 mRNA +30S亚基-IF3 A位 IF-3 5? 3? IF2 GTP P位 IF3 IF2 IF1 IF2-GTP-fRNA-tRNA IF3 70S亚基 IF2+ IF1+GDP+Pi IF-1 IF1 肽链的延长 1 2 1 2 2 3 2 3 进位 肽键形成 移位 进位 (Tu\Ts) GTP GTP N-端 2 3 5′ 3′ C-端 肽键形成 1 5′ 3′ (EF-G) 肽链合成的终止及释放 (1)释放因子RF1或RF2进入核糖体A位。 (2)多肽链的释放 (3)70S核糖体解离 5? 3? UAG 30S亚基 50S亚基 5? 3? UAG tRNA RF 肽键的形成 Tu\Ts循环 多多核糖体与核糖体循环 合成完毕的肽链 多核糖体 3ˊmRNA 延伸中的肽链 5ˊ 核糖体循环 真核生物多肽链的合成 ? 真核细胞核糖体比原核细胞核糖体更大更复杂; ? 起始氨基酸为Met,不是fMet; ?肽链合成的起始:由40S核糖体亚基首 先识别mRNA的5’端-帽子,然后沿mRNA移动寻找AUG; ? 起始因子有12种,但只有2种延长因子和1种终止因子; ? 真核细胞种线粒体、叶绿体的核糖体大小、组成及蛋白质合成过程都类似于原核细胞。 肽链折叠是指从多肽链的氨基酸序列形成具有正确三维空间结构的蛋白质的过程。 体内多肽链的折叠目前认为至少有两类蛋白质参与,称为助折叠蛋白: (1)酶:蛋白质二硫键异构酶(PDI); (2)分子伴侣 肽 链 的 折 叠
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