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生物碱试剂(不可逆沉淀、变性沉淀):苦味酸、三氯乙酸等与蛋白质结合生成沉淀。 + 物理因素(不可逆沉淀、变性沉淀):在加热、加压、紫外线等物理因素作用下,蛋白质的构象也会被破坏而沉淀。 4、蛋白质的变性: 当蛋白质受到物理或化学因素影响时,可使蛋白质二、三级结构的结合力遭受破坏,肽链松散,导致蛋白质在理化和生物性质上的改变,这种现象称为蛋白质的变性。 变性条件: 物理因素:干燥、加热、高压、振荡或搅拌、紫外线、X射线、超声等等。 化学因素:强酸、强碱、尿素、重金属盐、生物碱试剂(三氯乙酸、乙醇等等)。 变性后的特点: ① 丧失生物活性 ②变性蛋白质通常都是固体状态物质,不溶于水和其它溶剂,也不可能恢复原有蛋白质所具有的性质。所以,蛋白质的变性通常都伴随着不可逆沉淀。溶解度降低 ③ 易被水解(对水解酶的抵抗力减弱)。 变性作用的利用: ① 消毒、杀菌、点豆腐等; ② 排毒(重金属盐中毒的急救); ③ 肿瘤的治疗(放疗杀死癌细胞); 5、蛋白质的紫外吸收: 大部分蛋白质均含有带芳香环的苯丙氨酸、酪氨酸和色氨酸。这三种氨基酸的在280nm 附近有最大吸收。因此,大多数蛋白质在280nm 附近显示强的吸收。利用这个性质,可以对蛋白质进行定性鉴定。 6、蛋白质的颜色反应: 1)缩二脲反应:蛋白质分子中有许多酰胺键,因此与新配置的碱性硫酸铜溶液反应呈紫红色。称为缩二脲反应。 2)黄蛋白反应:因为组成蛋白质的氨基酸有芳香族氨基酸,若向蛋白质溶液中加入浓硝酸,则浓硝酸可使多肽链上氨基酸残基上的芳环发生硝化反应,而向蛋白质分子中导入生色团-NO2而呈黄色。 3)米勒(Millon)反应:蛋白质遇到硝酸汞的硝酸溶液[米勒试剂]生成不溶性的深红色沉淀。这是由于蛋白质多肽链上氨酸残基中有酚羟基,该羟基与Hg2+作用生成红色物质。 4)茚三酮反应:蛋白质与稀的茚三酮溶液加热,即呈现蓝色。可用于蛋白质的定性鉴定。 第四节 酶 一、酶的组成 二、酶催化反应的特异性 一、酶的组成 辅酶的种类颇多,按其化学组成可分两类: 1.无机的金属元素,如铜、锌、锰。 2.相对分子质量低的有机物,如血红素、叶绿素、肌醇、烟酰胺、维生素B1、B2、B6、B12等等。 二、酶催化反应的特异性 1、催化效率高(比一般催化剂高108~1010倍)。 2、选择性强 (1)化学选择性——能从混合物中挑选特殊的作用物。例如,麦芽糖酶只能使α-葡萄糖苷键断裂,而不能使β-葡萄糖苷键断裂。 (2) 立化学选择性——辨别对映体,酵母中的酶只能使天然D型糖发酵,而不能使相应的L型糖发酵。 3、反应条件温和——一般是在常温常压和pH 7左右进行的。 人体内如果缺少某种酶,就会引起疾病或死亡。 第五节 核 酸 一、核酸的组成 二、核酸的结构 三、核酸的生物功能 一、核酸的组成 核酸 单核苷酸 磷酸 核苷 戊碳糖 嘌呤碱和嘧啶碱 RNA→ 磷酸、核糖、腺嘌呤、胞嘧啶、鸟嘌呤、脲嘧啶。 DNA→ 磷酸、脱氧核糖、腺嘌呤、胞嘧啶、鸟嘌呤、胸腺嘧啶 1、核糖和2-脱氧核糖 2、碱基 腺嘌呤Adenine 核苷酸中的碱基主要有五种,都是嘧啶或嘌呤的衍生物。它们是:胞嘧啶,脲嘧啶,胸腺嘧啶,腺嘌呤,鸟嘌呤。 C U T A G 3、核苷 (1)核苷——(由RNA水解而得) (2) 2-脱氧核苷——(由DAN水解而得) 9-?-D-脱氧核糖腺嘌呤 2-脱氧核糖腺苷(脱氧腺苷)) 核苷共有八种:脱氧腺苷、脱氧鸟苷、脱氧胞苷、脱氧胸腺苷、腺苷、鸟苷、胞苷、脲苷。 4、核苷酸 5’-一磷酸腺苷( 5’ -腺苷一磷酸)(5’ –AMP) 5’-腺苷三磷酸(5’-ATP) 二、核酸的结构 1、核酸一级结构:核酸是由许多单核苷酸分子按照一定的方式、数量和排列顺序彼此相连而形成的多核苷酸链。 2、核酸的二级结构 DNA分子
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