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实验五 微生物细胞大小的测定 微生物细胞的大小是微生物分类鉴定的重要依据之一。微生物个体微小,必须借助于显微镜才能观察,要测量微生物细胞大小,也必须借助于特殊的测微尺在显微镜下进行测量。 一、实验目的和内容 目的:学会测微尺的使用和计算方法及对微生物的测量。 内容: 1. 认识测微尺,学习目镜测微尺的标定。 2.测定细菌菌体的大小。 二、实验材料和用具 器材 显微镜、目镜测微尺、镜台测微尺,载玻片、盖玻片、擦镜纸等 菌种 金黄色葡萄球菌,产气杆菌 三、操作步骤 l.认识测微尺的构造 显微镜测微尺是由目镜测微尺和镜台测微尺组成。 目镜测微尺是一块圆形玻璃片,其中有精确的等分刻度,在5mm刻尺上分50份。目镜测微尺每格实际代表的长度随使用接目镜和接物镜的放大倍数而改变,因此在使用前必须用镜台测微尺进行标定。 镜台测微尺为一专用中央有精确等分线的载玻片,一般将长为1mm的直线等分成100个小格,每格长0.0lmm即10μm,是专用于校正目镜测微尺每格长度的。 2.目镜测微尺的标定 把目镜的上透镜旋开,将目镜测微尺轻轻放在目镜的隔板上,使有刻度的一面朝下。将镜台测微尺放在显微镜的载物台上,使有刻度的一面朝上。先用低倍镜观察,调焦距,待看清镜台测微尺的刻度后,转动目镜,使目镜测微尺的刻度与镜台测微尺的刻度相平行,并使两尺左边的一条线重合,向右寻找另外一条两尺相重合的直线。 3.计算方法 标定公式: ? 目镜测微尺每格长度(μm) 两条重合线间镜台测微尺的格数×10 = 两条重合线间目镜测微尺的格数 用以上计算方法分别校正低倍镜及高倍镜下目镜测微尺每格实际长度。 4.菌体大小的测定 制片 将镜台测微尺取下,换上制片 ,先在低倍镜下找到目的物,然后在高倍镜下用目镜测微尺测量菌体的大小。先量出菌体的长和宽占目镜测微尺的格数,再以目镜测微尺每格的长度计算出菌体的长和宽。 例如,目镜测微尺在这架显微镜下,每格相当于1.5μm,测量的结果,若菌体的平均长度相当于目镜测微尺的2格,则菌体长应为2×1.5μm=3.0μm。 一般测量菌体的大小,应测定10~20个菌体,求出平均值,才能代表该菌的大小。 五、实验报告 1.目镜测微尺标定结果: 低倍镜下 倍目镜测微尺每格长度是 μm。 高倍镜下 倍目镜测微尺每格长度是 μm。 2.菌体大小测定结果: 测微尺用后归还并签字 ?? 操作录像 * * *
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