中山大学遗传学课件2009-遗传图的制作和基因定位.pptVIP

遗传图的制作和基因定位 By Li Gang Outline 1、真核生物基因定位的基本方法和遗传图的制作。 2、脉孢霉四分子及其遗传学分析。 2.1 四分子分析与着丝粒作用。 2.2 二对基因的四分子分析。 3、体细胞交换与基因定位： 4、人类基因定位的基本方法 4.1家系分析法。 4.2 体细胞杂交定位。 4.3 核酸杂交技术。 5、细菌的遗传分析与基因定位。 5.1 细菌的转化与基因定位。 5.2 细菌的接合与基因定位。 5.3 细菌的转导与作图。 6、噬菌体的重组作图。 6.1 用于噬菌体作图的常用表型特征。 6.2 噬菌体的遗传重组与作图。 6.3 噬菌体的遗传图为环形但DNA却是线状的。 6.4 T4噬菌体的遗传学图。 1、真核生物基因定位的基本方法和遗传图的制作。 大量实验表明，两个基因之间的重组值是相对恒定的，不同基因之间的重组值却不同，这表明生物体的各个基因在染色体上的位置是相对恒定的。 重组值的大小反映基因座在染色体上距离的远近，摩尔根于1911年提出设想，如果将交换的百分率直接定为染色体上基因座之间的相对距离单位，这样人们就有可能根据交换率来确定基因在染色体上的相对位置。 图距（map distance） 即两个基因在染色体图上距离的数量单位，它以重组值1%去掉%号表示基因在染色体上的一个距离单位，即某基因间的距离为一个图距单位（map unit, mu）。 后人为了纪念现代遗传学的奠基人摩尔根，将图距单位称为厘摩（centimorgan, cM）。 基因定位（gene mapping） 是指将基因定位于某一特定的染色体上，以及测定基因在染色体上线性排列的顺序与距离。 基因定位的目的是通过将基因定位于染色体的基因座上后，帮助我们理解和开发生物性状的遗传物质，特别是通过遗传连锁将一种性状的遗传与另一种性状或标记相联系，或者通过将表型差异与染色体结构的改变联系起来。这在商业上可用于改良动植物的性状、定位与克隆人类的疾病基因等。 两个基因之间的距离可以通过交换值来计算，交换值又可以通过新组合在整个后代中的比例来计算，因此可以通过交换值对基因进行定位。当然这种定位并不是基因间的绝对位置，而是指基因在染色体上的排列次序和彼此之间的相对距离。 基因定位的基本方法 两点测交：指每次只测定两个基因间的遗传距离，这是基因定位的最基本方法。 三点测交：就是通过一次杂交和一次测交，同时确定三对等位基因（即三个基因位点）的排列顺序和它们之间的遗传距离。三点测交能测出双交换，因此更能准确地反映出连锁基因间的相对距离。 两点测交的实例 已知玉米粒糊粉层有色C（或无色c）、胚乳饱满Sh（或缺陷sh），胚乳非糯性Wx（糯性wx）三对相对性状表现为连锁遗传，它们位于同一对同源染色体上。要测定这三个基因位点之间的距离和顺序，我们需要分别进行三次杂交和三次测交。 这里要注意的是用于测交的F1必须是双杂合体，否则无法检出重组。 C和Sh两对基因的遗传实验 CSh/CSh X csh/csh CSh/csh X csh/csh CSh/csh csh/csh Csh/csh cSh/csh 4032 4035 149 152 C与Sh之间的图距 重组率： [（152+149）/（4032+4035+149+152）] X 100%=3.6% 因此C与Sh之间的图距为3.6 cM Wx,C和Sh之间的位置关系图 由于Wx和C之间的图距21.7更接近（20.3+3.6）=23.9 而不是（20.3-3.6）=16.7，所以三个基因之间的位置关系和距离应为下图： 三点测交的实例 做三点测交时需要用这三个基因的杂合子（如abc/+++或ab+/++c）同这三个基因的隐性纯合子（abc/abc）测交。我们还以玉米的上述三个基因为例说明，假如用于三点测交的两个亲本为：＋＋＋／＋＋＋和c sh wx/c sh wx,则Ｆ１代的基因型为：+++/c sh wx,然后Ｆ１与三隐性纯合体c sh wx/ c sh wx测交，获得下表所示结果。 玉米三对基因的三点测交结果 两点测交和三点测交总结 两点测交工作量非常大，比如要确定四对基因，则需6次杂交和6次测交，并且由于环境和基因间的影响，使得测定结果会发生偏差；另外在两点测交中，对于双交换是无法检出的，因为在两个基因间双交换的结果等于没交换。 三点测交工作量大大降低，而且测定结果更准确，且可以检出双交换。 两点测交和三点测交都必须用杂合体，否则就无法判断是否发生了交换。 干涉（interference） 对同一染色体上的三个基