第7讲植物细胞培养制备代谢产物II讲义资料.pptVIP

（3）搅拌与剪切力 为了加强气－液－固之间的传质，细胞悬浮培养时需要混合搅动。 植物细胞虽然有较硬的细胞壁，但是细胞壁很脆弱，对搅拌的剪切力很敏感。由于剪切力比较大，细胞会自溶，次级代谢产物合成会降低。 各种植物细胞耐受剪切力的能力不尽相同。烟草细胞和长春花细胞在涡轮搅拌器转速150 rpm和300 rpm时一般还能生长。培养桔叶鸡眼藤细胞时，涡沦搅拌器的转速应低于20 rpm。 剪切力影响的克服可以通过低剪切力的生物反应器开发与耐受高剪切力的细胞株筛选来实现。 （4）泡沫与器壁表面粘附性 与微生物细胞培养相比，植物细胞培养过程中产生的气泡更大，而且由于培养液含有蛋白质或粘多糖，粘度大，细胞很容易被包埋在泡沫里，造成非均相培养，也可从营养液中带出来，造成损失或污染。因此，必须对泡沫进行消除。 消泡剂、机械去除。 五 提高次级代谢产物产量的途径 培养设备：选择或设计合适的生物反应器。 培养工艺：诱导子添加、前体喂养、添加竞争途径代谢产物抑制剂、培养条件（培养基、环境条件）优化与控制、流加培养。 培养技术：固定化培养技术、两相培养技术、两步法培养（第1步细胞生长；第2步产物积累）。 四 植物细胞培养生产次级代谢产物的讨论 （一）水母雪莲细胞培养 生产黄酮类化合物 雪莲花 。。。花园里种不出天山上的雪莲花，不经历磨难我找不到今生的幸福。。。 “艾里郎和赛乃姆”（刀郎） “回到拉萨”（郑钧）：。。。爬过了唐古拉山遇到了雪莲花。。。我美丽的雪莲花。。。 “雪莲花”（小舟）：。。。我思念远方的家乡，天山开满雪莲花。。。 “雪莲花”（罗天蝉）。。。我采了一朵雪莲花，她是我心中最美丽的花。。。洁白无瑕。。。勤劳的人、纯洁的人才配拥有它。。。 “遇上你是我的缘”（央金兰泽）。。。我爱你，就像山中的雪莲花。。。 雪莲被视为神物。高山牧民在行路途中遇到雪莲时，被认为有吉祥如意的征兆，并以圣洁之物相待。 雪莲 雪莲，别名雪荷花。雪莲花除产于我国西藏外，在我国的新疆、青海、四川、云南也有分布。3000-5000M海拔以上。 早在清代,赵学敏著的本草纲目拾遗中就有以下记载： “大寒之地积雪,春夏不散,雪间有草,类荷花独茎,婷婷雪间可爱”；“其地有天山,冬夏积雪,雪中有莲,以天山峰顶者为第一”。 药用价值 雪莲在医药上应用以有数百年的历史。我国汉族人民多视为治疗风湿关节炎之珍品；维吾尔、哈萨克族则当作妇科良药。 印度民间还雪莲花来治疗许多慢性病患者。如胃溃疡、痔疮、支气管炎、心脏病、鼻出血和蛇咬伤等症。 在藏医藏药上雪莲花作为药物已有悠久的历史。 藏医学文献《月王药珍》和《四部医典》上都有记载。 雪莲中黄酮类化合物为主要成分。黄酮类化合物以黄酮（2-苯基色原酮）为母核而衍生的一类黄色色素。其中包括黄酮的同分异构体及其氢化的还原产物，也即以C6-C3-C6为基本碳架的一系列化合物。 类黄酮化合物具有多种生物活性，除具有抗菌、消炎、抗突变、降压、清热解毒、镇静等作用外，在抗氧化、抗癌、防癌等方面也有显著效果；是大多数氧自由基的清除剂，因而能提高过氧化物歧化酶(SOD)的活力，减少脂质过氧化物丙二醛(MDA)及氧化低密度脂蛋白(OX—LDL)的生成，对治疗冠心病、心绞痛、高血压等有显著效果；对降低舒张压，防治心律失常、心血管病和活血化瘀也起重要作用。 雪莲种类繁多,如水母雪莲、毛头雪莲、绵头雪莲、西藏雪莲等。 ? 水母雪莲(Saussures medusa)属菊科凤毛菊属雪兔子亚属植物。 ? 自然资源有限，生长条件苛刻，很难人工栽培。 ? 通过水母雪莲细胞培养生产黄酮有着重要意义。 思考题 ?? Q1.作者是从哪几个方面进行黄酮生产优化的? ?? Q2.黄酮积累和细胞生长属于哪种类型关系? ?? Q3.接种量大小对细胞生长和产物积累的作用是怎样的?为什么? ?? Q4.如何解释聚集体大小于产物积累的关系? ?? Q5.为什么搅拌生物反应器培养的黄酮产量低于摇瓶培养? 生物反应器 1 搅拌桨选择 对比了倾斜式搅拌桨、透平浆，选择前者。 2 3 4 5 6 放大培养产量降低的因素分析 延伸文献讨论: 提高水母雪莲细胞培养生产黄酮的产量的研究 1 高产细胞系筛选 第7讲 植物细胞代谢产物制备Ⅱ 一 代谢产物 初级代谢产物（Primary metabolites） 是通过初级代谢产生的维持细胞生命活动必需的物质，如氨基酸、核苷酸、多糖、脂类等。在不同种类的细胞中，初级代谢产物的种类基本相同。初级代谢产物的合成无时无刻都在进行着，任何一种产物的合成发生障碍都会影响细胞正常的生命活动，甚至导致死亡。 次级代谢产物（Secondary metabolites） 是通过次级代谢合成的产物，大多是分子结构比较复杂的小分子化合物，例如抗