微生物培养基手册大全.docVIP

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微生物培养基手册大全 临床微生物培养基手册大全 1、营养琼脂(普通琼脂) 成份:牛肉浸液(或其它浸液,消化液或肉膏汤)? ?100毫升 ? ?? ?琼脂(视天气,琼脂质量而定) 制法:将上物加热溶解,补足水,调ph至7.6,过滤分装121℃,高压灭菌15分钟。 用途:作普通琼脂平皿。 2、血琼脂平板(BA) 制法:取营养琼脂(PH7.6),加热使其溶解待冷至45-50℃,以灭菌操作于每100毫升营养琼脂加灭菌脱纤维羊血或兔血5-10毫升,轻轻摇匀,立即倾注于平板或分装试管,制成斜面备用。 用途:1. 一般棉拭子均接种此培养基。 ? ?? ?2.尿液,脓液 ? ?? ?3.分离细菌标本用。 3、基础培养基 (肉膏汤BB) 成份:蛋白胨 10克? ???牛肉膏? ?5克? ? ? ?? ?氯化钠? ?5克? ???水? ???1000毫升 制法:将以上各物称好,加水煮沸溶解,用1NNOH校正PH至7.6,过滤分瓶,121℃高压灭菌,20分钟备用。 用途:1 作耐药试验,增菌用分装小管。 ? ?? ?2 作普通琼脂斜面。 4、血液培养基(大管肉汤培养基) 成份:1 新鲜牛肉浸液? ?1000毫升? ? ? ?? ?2 PABA(对氨基苯甲酸〔相当于10mg/毫升〕)? ?1g% 1毫升 ? ?? ?3 MgSO4? ?[相当于0.493/100毫升]? ?? ? 49.3% 1毫升 ? ?? ?4 枸椽酸钠? ?? ?? ?? ?? ?? ?? ?? ? 0.3g 制法:1 将1号,4号混合液,2号,3号液分装高压灭菌。 ? ?? ?2 取灭菌1,4号混合液用无菌法加入PABA,MgSO4,再分管,行无菌试验三天方可使用。 用途:作血,骨髓培养用。 5、肠道杆菌培养基(伊红美兰琼脂) 成份: 蛋白胨? ?10克? ?? ?? ?乳糖? ???10克 ? ?? ???氯化钠? ?5克? ?? ?? ?琼脂? ???25(22)克 ? ?? ???水? ?? ? 1000毫升? ???2%伊红溶液20毫升 ? ?? ???0.5%美兰溶液? ?20毫升 制法:将蛋白胨,氯化钠琼脂称好,加水1000毫升使溶解,校正PH7.4过滤,补足失水,加入2%伊红溶液20毫升,0.5%美兰溶液20毫升,(115℃高压20分钟),冷却至50℃左右倾注平板,凝固后存冰箱备用。(高压以后方可再加乳糖) 用途:用作分离沙门氏,志贺氏菌属,也作菌群调查。 ? ?? ?? ?? ?? ?? ?? ?? ???1 6、罗文斯坦培养基 成份:磷酸二氢钾? ???2.4克? ?? ?? ?硫酸镁? ?0.24克 ? ?? ?枸椽酸钠? ?? ? 0.6克? ?? ?? ?天门冬素 3.6克 ? ?? ?纯甘油(丙三醇) 12毫升? ?? ?? ?水? ???600毫升 ? ?? ?马铃薯粉? ?? ? 30克? ?? ?? ???鸡蛋? ?1000毫升(约3公斤) ? ?? ?2%孔雀绿水溶液 20毫升? ??? 制法:1 除鸡蛋外(还有孔雀绿)。可将其它物品称好,放入大三角瓶包扎好,高压灭菌。 ? ?? ?2 鸡蛋用75%酒精泡30分钟,灭菌法打蛋,倒入盛有玻璃珠的灭菌三角烧瓶内充分将鸡蛋摇散。 ? ?? ?3 将各成份按比例配好,分装每管约5毫升。 ? ?? ?4 间歇灭菌第一次90℃1小时,第二次80℃半小时,第三次80℃半小时(或放85℃烤箱内连续二次)。 质控标准: 1 灭菌试验合格。 ? ?? ?? ?? ?2 接种结核杆菌要求两星期生长良好。 用途:作结核分枝杆菌培养用。 7、结核半固体培养基 成份:磷酸氢二钠? ?? ? 19克? ?? ?? ???硫酸镁? ???0.6克 ? ?? ?磷酸二氢钾? ?? ? 2.5克? ?? ?? ?天门冬素? ?5克 ? ?? ?1%孔雀绿? ?? ? 1.5克? ?? ?? ???甘油? ?? ? 20毫升 ? ?? ?吐温80(10%) 5毫升? ?? ?? ???水? ?? ? 1000毫升 ? ?? ?枸椽酸钠? ?? ?? ?2.5克? ?? ?? ???动物血清? ?100毫升 ? ?? ?琼脂? ?? ?? ???1.5克(80小时用甲醇去脂) ? ?? ?1%孔雀绿? ?? ? 0.78毫升? ?? ? 吐温80(10%) 5毫升 ? ?? ?加动物血清? ???100毫升 制法: 1 除血清外将上述药品均称好,放入煮沸溶解,调PH7。2 ? ?? ?2 分管(每管约10毫升)包扎好,高压,121℃半小时灭菌。 ? ?? ?3 待冷后无菌法加无菌血清(绵羊血或兔血)每管约1毫升备用。 ? ?? ?4 去除琼脂方法:取琼脂若干或于三角烧瓶中加甲醇于琼脂1毫升用塞密封,放37℃温浴80小

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