核酸适体技术-公开课件（讲义）.pptVIP

研究核酸与蛋白质的相互作用的方法 ----核酸适体技术 核酸适体(aptamer)指的是经体外筛选技术SELEX(指数富集配体系统进化)筛选出的能特异结合蛋白质或其他小分子物质的寡聚核苷酸片段,对可结合的配体有严格的识别能力和高度的亲和力。核酸适体在生物传感器、新药开发以及纳米技术等方面有着广泛的用途。 SELEX技术 SELEX是指数富集配体系统进化(Systematicevolution of ligands by exponential enrichment)的简称,其筛选流程包含和达尔文进化理论一样的三个过程,分别是自发突变、自然选择和大量增殖。 利用现有的分子生物学技术人工合成一个含有1014～1015个单链寡核苷酸序列的随机文库,序列长度一般在25～35个核苷酸之间,这一步起到达尔文进化论中自发突变的作用。 一“自发突变” 单链的随机寡核苷酸序列,容易形成可与蛋白质、核酸等配体特异性共价结合的二级结构。在这一高亲和力特异性结合的基础之上,配体如氨基酸、多肽、甚至金属离子都可以同随机文库相互作用,这种特异性结合类似于达尔文进化论中的自然选择作用。 二“自然选择” 选择性分离出核酸适体后,通过PCR或RT-PCR等技术进行扩增,生成次一级文库,这种扩增达到了达尔文进化论中的大量增殖的效果。 三“大量增殖” 适体与配体的相互作用 核酸适体上富含嘌呤的环常作为外来靶